Виконати лабораторні роботи: 1)Якісні реакції на інсулін; 2)Якісні реакції на адреналін; 3)Вплив інсуліну та адреналіну на вміст глюкози в крові. Оформити і захистити протокол.
Методика виконання роботи
1. Якісні реакції на інсулін.
Принцип методу. Інсулін дає характерні реакції на білок: біуретову, Геллера, Фоля, Міллона та ін.
а) Біуретова реакція (Піотровського) відкриває пептидний зв’язок в білку: до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель 10% розчину їдкого натрію, 2 краплі 1% розчину сульфату міді і все перемішують; вміст пробірки набуває фіолетового кольору.
б) Реакція на тирозин (Міллона): до 5 крапель розчину інсуліну вносять 3 краплі реактиву Міллона і обережно нагрівають; в пробірці з’являється цеглисто-червоне забарвлення (утворення осаду ртутної солі динітротирозину);
в) Реакція на амінокислоти, що містять слабозв’язану сірку (Фоля): до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель реактиву Фоля, інтенсивно прокип’ячують і додають постояти 1-2 хвилини; з’являється чорний або бурий осад сульфіду свинцю.
г) Нінгідринова реакція: до 5 крапель розчину інсуліну додають 5 крапель 0,5% розчину нінгідрину і злегка підігрівають; спостерігають появу рожево-фіолетового забарвлення, яке згодом синіє.
Якісні реакції на адреналін
Принцип методу. Адреналін дає слаболужну реакцію, легко окислюється на повітрі з утворенням адренохрому, внаслідок чого розчин забарвлюється в червоний колір. При взаємодії з нітритом спостерігається жовто-оранжеве забарвлення з діазореактивом – червоне і з хлорним залізом – зелене. Реакція з хлорним залізом характерна для пірокатехінового кільця, яке входить в молекулу адреналіну та норадреналіну. При взаємодії діазореактиву з адреналіном рідина забарвлюється в червоний колір внаслідок утворення складної сполуки типу азобарвника.
а)реакція з хлорним залізом.
Хід роботи. В пробірку наливають 10 крапель розчину адреналіну і додають 1 краплю хлорного заліза. Спостерігається зелене забарвлення. Внаслідок наявності пірокатехіну в молекулі адреналіну. Додають три краплі 10%-го розчину їдкого натрію і спостергають вишнево-червоне забарвлення.
4. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. – Біохімія людини, 2004.
Обговорено і затверджено на засіданні кафедри
Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М.
Заняття № 21
Тема: Клініко-біохімічна характеристика жиророзчинних вітамінів. Вітаміни як фармпрепарати.
Актуальнiсть теми:Вітаміни – низькомолекулярні органічні речовини різноманітної хімічної природи, які в організмі не синтезуються чи їх синтез обмежений, і тому вони є незамінними факторами їжі. При їх недостатності розвиваються гіповітамінози. Вітаміни та їх похідні широко використовуються як фармпрепарати.
Навчальнi цiлi:
Знати: Хімічну структуру і біологічну роль жиророзчинних вітамінів, клінічні прояви їх недостатності чи надлишку.
Вмiти:Виконати якісне виявлення жиророзчинних вітамінів.
Самостiйна позааудиторна робота
1. Охарактеризувати жиророзчинні вітаміни за схемою: назва, структура, біологічна роль, клінічні прояви гіпо- і гіпервітамінозів, добова потреба.
2. Підготувати вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи.
Контрольнi питання
1. Загальна характеристика вітамінів.
2. Класифікація і номенклатура вітамінів.
3. Порушення балансу вітамінів в організмі: екзогенні та ендогенні гіпо (а) вітамінози, гіпервітамінози.
4. Жиророзчинні вітаміни А, D, Е, К, F: хімічна структура, біологічна роль, клінічні прояви недостатності та надлишку, добова потреба.
5. Жиророзчинні вітаміни та їх похідні як фармпрепарати. Антивітаміни.