Метод основан на окислении альдегидной группы сахаров (глюкозы, лактозы) йодом в щелочной среде. Массовую долю сахарозы определяют по разности между количеством взятого и неизрасходованного йода, определяемого титрованием тиосульфата натрия.
Для протекания реакции необходимо чтобы йода было в 2-3 раза было больше, чем требуется для окисления глюкозы, щелочи должно быть в полтора раза больше по объему, чем раствора йода.
Массу навески М в граммах рассчитывают по формуле:
M =
где V – вместимость мерной колбы, см3; Р – предполагаемая массовая доля редуцирующих веществ в исследуемом изделии, %; С – оптимальное содержание редуцирующих веществ в 100 см3 раствора навески, г. Принимаем С = 4 мг/см3.
Материалы, оборудование: электрическая водяная баня; термометр ртутный стеклянный с пределом измерения 150 оС; мерные колбы вместимостью на 100 и 250 см3; фарфоровая ступка с пестиком; пипетка вместимостью 5,10, 50 см3, конические колбы вместимостью 100, 250 см3; мерный цилиндр вместимостью 10 см3.
Проведение анализа. Из подготовленной пробы взвешивают навеску, рассчитанную по формуле, с точностью до 0,01 г, растирают ее в ступке с помощью 100-120 см3 дистиллированной воды, прибавляя ее порциями. Затем содержимое ступки количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3. Колбу с содержимым нагревают на водяной бане при температуре не выше 60 оС в течение 15 мин при частом взбалтывании, затем содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры. К охлажденному раствору прибавляют по 2 см3 15% -ого раствора железисто-синеродистого калия и 30 % -ого сернокислого цинка. Содержимое тщательно перемешивают и через 10-15 мин доводят до метки дистиллированной водой и фильтруют содержимое колбы в сухую колбу через бумажный фильтр.
10 см3 фильтрата используют для определения редуцирующих сахаров йодометрическим методом, 50 см3 фильтрата используют для гидролиза сахаров.
Гидролиз дисахаридов. 50 см3 фильтрата переносят в мерную колбу на 100 см3. Туда же приливают 5 см3 20 %-ой соляной кислоты и помещают колбу на 8 мин в водяную баню, нагретую до 70 °С. Затем колбу быстро охлаждают до комнатной температуры, нейтрализуют содержимое 10 % раствором гидроокиси натрия (или калия) в присутствии метилового красного до появления желто-розового окрашивания, доводят водой до метки. Фильтрат используют для определения редуцирующих сахаров после гидролиза.
В одну коническую колбу на 200 см3 помещают 10 см3 фильтрата до гидролиза, во вторую 10 см3 после гидролиза. В каждую колбу приливают 25 см3 0,1 н раствора йода и при перемешивании 35 см3 0,1 н раствора NaOH. Колбу закрывают и помещают в темное место на 20 мин. Затем в колбы приливают и 10 см3 0,5 н раствора соляной кислоты. Выделившийся йод титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия до появления светло-желтой окраски. Затем к раствору добавляют 1 см3 крахмала и продолжают титровать, до исчезновения синей окраски.
Параллельно проводят контрольный опыт, в котором вместо водной вытяжки берут дистиллированную воду.
Массовые доли глюкозы (Х1) до гидролиза и (Х2) после гидролиза процентах рассчитывают по формуле(1.8):
, ( 1.8)
где V1 - объем 0,1 н раствора тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, см3; V2- объем 0,1 н раствора тиосульфата, израсходованный на титрование в рабочем опыте, см3; 0,009 количество глюкозы, соответствующее 1 см3 0,1 н раствора йода; Р- фактор разведения .
Расхождения между параллельными определениями не должны превышать 0,3 %.
Массовую долю сахарозы S в процентах в пересчете на сухое вещество рассчитывают по формуле (1.9):
(1.9)
где Х1 – количество редуцирующих сахаров до гидролиза сахарозы, %; Х2 – количество общего сахара после гидролиза дисахаридов, %; 0,95 – коэффициент пересчета инвертного сахара на сахарозу, W – массовая доля воды в продукте