Помощничек
Главная | Обратная связь


Археология
Архитектура
Астрономия
Аудит
Биология
Ботаника
Бухгалтерский учёт
Войное дело
Генетика
География
Геология
Дизайн
Искусство
История
Кино
Кулинария
Культура
Литература
Математика
Медицина
Металлургия
Мифология
Музыка
Психология
Религия
Спорт
Строительство
Техника
Транспорт
Туризм
Усадьба
Физика
Фотография
Химия
Экология
Электричество
Электроника
Энергетика

Количественное определение ПВК в моче



 

В организме человека ПВК образуется в процессе обмена углеводов в качестве промежуточного продукта. В норме в плазме крови содержится 0,8-1,5 мг % ПВК. При усилении гликолиза происходит накопление пирувата и лактата в крови, что сопровождается обычно изменением кислотно-основного состояния, уменьшением щелочных резервов. Увеличение содержания лактата и пирувата в крови может наблюдаться также при поражении паренхимы печени (поздние стадии гепатита, цирроз печени) в результате торможения процессов гликонеогенеза в печени. Повышенное количество лактата и пирувата в крови обнаруживается при болезни Гирке чаще всего встречающегося гликогеноза. При авитаминозе и гиповитаминозе В1 в крови и в других тканях, особенно в мозгу, ПВК накапливается в большом количестве. За сутки с мочой выделяется до 200 мг ПВК.

Принцип работы: ПВК с 2,4 – динитрофенилгидразином образует окрашенное соединение 2,4 – динитрофенилгидразон ПВК.

2,4- ДНФ-гидразин ПВК – желто-оранжевого цвета интенсивность его пропорциональна концентрации ПВК и определяется фотометрически.

Ход работы. Берем 2 пробирки, в контрольную пробирку наливаем по 1 мл воды, в опытные по 1 мл мочи, разбавленной в 2 раза. Затем во все пробирки приливаем по 1 мл 2,5% р-ра КОН, перемешиваем прибавляем по 0,5 мл 1% раствора ДНФГ и оставляем на 15 мин. Фотометруем с синим сфетофильтром.

Расчет. Проводим по калибровочному графику, найденную величину умножают на суточный диурез (1500 мл для мужчин, 1200 у женщин) и получаем количество ПВК в суточной моче.

 

КДЗ ПВК и лактата: В крови практически здоровых взрослых людей содержится от 0,0456 ммоль/л (45,6 мкмоль/л, 4 мг/л) – 0,0912 ммоль/л, 8 мг/л) ПВК. Содержание ПВК увеличивается при гипоксических состояниях, вызванных тяжелыми сердечно-сосудистой, легочной недостаточностью, анемией, остром гепатите, инсулиновой зависимости, сахарном диабете, после введения камфоры, стрихнина и при увеличении физической нагрузки уменьшается до 0,57 ммоль/л и ведет к судорогам. Увеличение уровня ПВК приводит к В1-витаминной недостаточности, токсическое действие аспирина вызывает в большой дозе метаболический ацидоз, отравление тяжелыми металлами. Все факторы обуславливающие увеличение концентрации ПВК обычно приводят к увеличению уровня молочной кислоты. Уровень лактата (МК) в крови увеличивается при гипоксическом состоянии, вызванном развивающимися множественными кровотечениями, острой застойной сердечной недостаточностью. Особенно много МК накапливается в воспалительных клетках, остром гепатите, инфекционной эпилепсии, увеличении мышечных нагрузок.

Норма МК в крови составляет 1,0135 ± 0,072 ммоль/л, при выше перечисленных состояниях увеличивается соотношение МК-ПВК, чаще оно составляет 10:1. Норма ПВК составляет 284,2 ммоль/сут или 25 мг/сут.

Контрольные вопросы

1. Напишите уравнение обратной лактатдегидрогеназной реакции, перерисуйте схему цикла Кори.

2. Разбнритесь в механизме работы ПДК. Зарисуйте схему процесса.

3. Уясните биохимические механизмы формирования и компенсации кислородной задолжности.

4. Почему после тяжелой физической работы у нетренированных людей появляется одышка?

5. Какие Вы знаете виды декарбоксилирования ПВК? В чем их сущность?

6. В чем сущность механизма пируватдегидрогеназной реакции?

7. Какие коферменты и ферменты участвуют в пируватдегидрогеназной реакции?

8. Почему липоевая кислота является центральным звеном окислительного декарбоксилирования пирувата?

9. Как регулируется ПДК в организме человека?

10. Почему и как по лактату в артериальной и венозной крови можно судить о метаболическом состоянии органа (например мозга)?

11. Какой процесс называют циклом лимонной кислоты или ЦТК? Почему?

12. Какова роль щавелево-уксусной кислоты (ЩУК) в механизме ЦТК? Напишите формулу ЩУК?

13. Каков механизм синтеза ЩУК?

14. Напишите уравнение реакции ЦТК: а) до α – кетоглутаровой к-ты, б) от α – кетоглутаровой кислоты до ЩУК.

15. Напишите итоговое энергетическое уравнение ЦТК.

16. В каких стадиях ЦТК образуется СО2?

17. Каков механизм окислительного декарбоксилирования α – кетоглутаровой кислоты?

18. Напишите формулы промежуточных метаболитов ЦТК, являющиеся субстратами биологического окисления.

19. Напишите схему окисления в ЦТК, протекающей по укороченной цепи митохондриального окисления.

20. Напишите схему субстратного фосфорилирования, протекающую в ЦТК.

21. Напишите уравнение реакции окислительного фосфорилирования в ЦТК, имеющие: а) Р/0=2, б) Р/0=3.

22. Биологическое значение цикла Кребса (ЦТК).

23. Какие витамины необходимы для протекания реакции ЦТК?

24. Какие промежуточные метаболиты ЦТК используются в процессах синтеза?

25. Какова локализация ферментов ЦТК в клетке?

26. Напишите уравнения реакции окислительной стадии пентозофосфатного пути окисления глюкозы.

27. Какие ферменты и коферменты участвуют в окислительных реакциях?

28. Биологическое окисление, значение пентозофосфатного пути окисления глюкозы.

29. Укажите точку образования НАДФ+Н+ в пентозном пути.

30. Как будет изменяться уровень и артерио-венозная разница по лактату к пирувату при гипоксии мозга?

31. Напишите уравнение синтеза лимонной кислоты. Каково энергетическое обеспечение этой реакции?

 




Поиск по сайту:

©2015-2020 studopedya.ru Все права принадлежат авторам размещенных материалов.