Помощничек
Главная | Обратная связь


Археология
Архитектура
Астрономия
Аудит
Биология
Ботаника
Бухгалтерский учёт
Войное дело
Генетика
География
Геология
Дизайн
Искусство
История
Кино
Кулинария
Культура
Литература
Математика
Медицина
Металлургия
Мифология
Музыка
Психология
Религия
Спорт
Строительство
Техника
Транспорт
Туризм
Усадьба
Физика
Фотография
Химия
Экология
Электричество
Электроника
Энергетика

Методика приготовление красящих растворов



ЛПЗ 2. Лабораторно - практическая работа №2

Тема: Биотико – микробиологические методы исследования воды и анализа результатов в экологии

Цель: ознакомиться с некоторыми методами биотико - микробиологического исследования ианализа полученных результатов в экологии.

Задачи:

1. провести исследование микробного пейзажа пробы воды, донных осадков, почвы и растений и дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам клеточной стенки (окраска по Граму);

2. сделайте оценку и проведите письменный анализ полученных результатов.

Задание:

1.Подробно ознакомьтесь с теоретической частью работы и запишите методы в методическую тетрадь, также сделайте лабораторно - практическую работу и результаты опишите в исследовательской тетради;

· исследовать микробный пейзаж пробыводы, раствора донных осадков, почвы и растений, также зарисовать морфологию бактерий и описать их;

· провести окрашивание мазков пробы воды, раствора донных осадков и почвы по Граму для определения дифференцирования имеющихся бактерий по биохимическим свойствам их клеточной стенки.

· На основании полученных данных напишите доклад и тезис доклада, также сделайте практические предложения по улучшению экологической ситуации.

Часть 1. Теоретическая часть

Биохимические свойства клеточной стенки бактерий

Микрофлора (Микро- + Флора, син.: бактериологический пейзаж, микробный пейзаж, флора микробная), сложившаяся в процессе эволюции устойчивая совокупность различных видов микроорганизмов, характерная для данного вида животного или растения, для определенной экологической ниши;

Микробный пейзаж совокупность видов микроорганизмов, обнаруженных в пробе .

Биохимические свойства клеточной стенки бактерий выявляют с помощью окраски по Граму. Отношение к окраске по Граму – важный для систематики признак бактерий, который зависит от структуры и химического состава клеточной стенки бактерий. Выделяют две большие группы - грамположительные (“грам+”) и грамотрицательные (“грам-“) бактерии.

Отличия ГР(+) и ГР(-) бактерий. Стенка грамположительных бактерий после окраски по Граму сохраняет комплекс йода с генциановым фиолетовым (окрашены в сине-фиолетовый цвет), грамотрицательные бактерии теряют этот комплекс и соответствующий цвет после обработки и окрашены в розовый цвет за счет докрашивания фуксином.

Особенности клеточной стенки грамположительных бактерий.Мощная, толстая, несложно организованная клеточная стенка, в составе которой преобладают пептидогликан и тейхоевые кислоты, нет липополисахаридов (ЛПС), часто нет диаминопимелиновой кислоты.

Особенности клеточной стенки грамотрицательных бактерий.Клеточная стенка значительно тоньше, чем у грамположительных бактерий, содержит ЛПС, липопротеины, фосфолипиды, диаминопимелиновую кислоту. Устроена более сложно - имеется внешняя мембрана, поэтому клеточная стенка трехслойная.

Методика приготовление красящих растворов

Раствор кристаллического фиолетового по Эрлиху: 1,2 г кристаллического фиолетового растворяют в 12 мл 96 % спирта и добавляют 100 мл свежеприготовленной анилиновой воды, полученной при смешивании 2 мл анилина со 100 мл воды. Эта красящая смесь может храниться 2 нед. Вместо кристаллического фиолетового можно использовать метиловый фиолетовый.

Красящие смеси для грамположительных бактерий:

1) 10 г кристаллического фиолетового + 100 мл спирта;

2) 10 г генцианового фиолетового +100 мл спирта;

3) 10 г метилового фиолетового + 100 мл спирта;

4) 1 мл насыщенного спиртового раствора кристаллического фиолетового + 10 мл дистиллированной воды;

5) 0,25 мл насыщенного спиртового раствора кристаллического фиолетового +100 мл 5 % раствора уксусной кислоты;

6) 8 - 9 г метиленового синего +100 мл спирта;

7) 30 мл насыщенного раствора метиленового синего в спирте + 1 г гидроксида калия + 99 мл дистиллированной воды.

Красящие смеси для грамотрицательных бактерий:

1) 8 — 9 г основного фуксина + 100 мл 96 % спирта;

2) 1 мл насыщенного спиртового раствора основного фуксина + 10 мл дистиллированной воды;

3) 1 г основного фуксина +1 г фенола + 0,5 мл глицерина + 10 мл 96 % спирта +100 мл дистиллированной воды;

4) 0,2 — 0,5 % водный раствор сафранина либо 0,25 % раствор сафранина в 10 % спирте.

Часть 2.

 




Поиск по сайту:

©2015-2020 studopedya.ru Все права принадлежат авторам размещенных материалов.