Изучите серологические реакции их значение для диагностики инфекционных заболеваний.

ИНСТРУКЦИЯ К ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗАНЯТИЮ № 5

ТЕМА: «Серологический метод диагностики. Реакции иммунитета».

Задачи:

Изучить неспецифические показатели иммунного статуса

Изучить специфические показатели иммунного статуса

Изучить принципы постановки серологических реакций и их значение для диагностики инфекционных заболеваний

Задание №1

Изучите неспецифические и специфические показатели иммунного статуса. Иммунодиагностика.

НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА

Иммунодиагностика – это применение совокупности иммунологических методов для выявления заболевания или определения возбудителя болезни в исследуемом материале.

Все методы иммунодиагностики делятся на две группы:

1) общие неспецифические методы, характеризующие состояние различных звеньев системы иммунитета: лимфоцитов, гранулоцитов, макрофагов, комплемента. Обычно их применяют для выявления дефекта в СИ, т.е. при иммунодефицитах;

2) специфические методы, позволяющие выявить антитела, иммунные Т-лимфоциты, антигены в организме человека или антигены возбудителя во внешней среде. Эти методы используют для диагностики инфекций, аллергии, аутоиммунных заболеваний.

Все эти методы применяют для оценки иммунного статуса человека, т.е. для характеристики состояния иммунной системы.

Иммунный статус – это состояние СИ (системы иммунитета) здорового или больного в определенный момент онтогенеза при конкретных условиях окружающей среды. Иммунный статус ребенка отличается от такового взрослого человека и изменяется под влиянием неблагоприятных воздействий. Для оценки иммунного статуса определяют неспецифические и специфические показатели. Оценка иммунного статуса – это процесс получения комплекса количественных и функциональных показателей, отражающих состояние СИ.

Она проводится с целью выявления природы иммунопатологии – иммунодефицитных и аллергических заболеваний.

Для этого сначала у больного собирают анамнез и проводят общеклиническое обследование. В нем важным является формула крови – количество лейкоцитов разных типов: нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов, лимфоцитов (более 9·10⁹/л) часто наблюдается при инфекциях; лейкопении – снижение их количества (менее 4·10⁹/л) – при аутоаллергии; эозинофилия - увеличение количества эозинофилов 9более 3 %) при аллергии и т.д. Однако этих данных обычно недостаточно и необходимо более детальное определение популяций, субпопуляций лейкоцитов и гуморальных факторов иммунитета.

Задание № 2

Изучите специфические показатели иммунного статуса.

СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОГО СТАТУСА

Для оценки специфических показателей иммунного статуса используют 3 группы методов:

1) методы определения антител различных классов (G, M, A, E, D) к определенным антигенам;

2) методы выявления иммунных T-лимфоцитов, несущих рецепторы к определенному антигену;

3) методы обнаружения антигенов.

Эти методы основаны на иммунных реакциях, которые ставят в лабораторных условиях. Есть две группы реакций: серологические (основаны на взаимодействии антигенов и антител) и клеточные, базирующиеся на взаимодействии антигенов (аллергенов) с T-клетками.

Задание № 3

Изучите серологические реакции их значение для диагностики инфекционных заболеваний.

Серологические реакции – это такие реакции, для постановки которых используют сыворотку, содержащую антитела. В их основе лежит специфическое взаимодействие антитела с антигеном.

Серологические реакции применяют для идентификации микроорганизмов, токсинов, любого антигена с помощью известных иммунных диагностических сывороток и для определения природы антител в сыворотке крови с помощью известных антигенов – диагностикумов. При этом метод определения видовой принадлежности (идентификация) микробов называют серологическим типажем, а способ определения титра антител в сыворотке крови – серологической диагностикой.

Общие закономерности серологических реакций:

1. Реакции ставят in vitro (на искусственных питательных средах).

2. Реакции проявляются при иммунологическом соответствии антигена и антитела, в оптимальных температурных условиях и рН среды.

3. Реакции протекают в две фазы:

v Специфическая – взаимодействие антигена с антителом.

v Неспецифическая – образование комплекса антитело – антиген.

Основными серологическими реакциями являются:

v Реакции агглютинации

v Реакции преципитации

v Реакция связывания комплемента

v Реакции нейтрализации экзотоксинов и вирусов

v Методы, основанные на связывании меченых антигенов и антител (ИФА, иммунофлюоресцентные методы)

v Кожные пробы и провокационные тесты

В серологических реакциях решается обычно две задачи:

1) с помощью известной антисыворотки в биологических жидкостях выделяют антиген;

2) с помощью известного антигена в сыворотке крови определяют антитела.

Для выявления неизвестного антигена (микроорганизма, белка и др.) используют диагностические иммунные антисыворотки, которые получают путем многократной иммунизации лабораторных животных соответствующими антигенами.

Обнаружение антител проводят с использованием специальных антигенов - иммунодиагностикумов. Часто это взвесь известных убитых (инактивированных) микроорганизмов. При выделении из клеток различных антигенов используют методы разрушения, экстракции, обработку ферментами и различными детергентами, центрифугирование.

Задание № 4

Поиск по сайту: