Диагностика генитального герпеса вирус простого инфекции в клинической лаборатории

ЖеромЛегофф, соответствующие author1 Элен-Пере, 2,3 и Лорана Bélec2,3

Информация об авторе ► Статьи ► заметки авторского права и лицензия Информация ►

Эта статья была исправлена. СмVirol J. +2015 13 октября; 12: 167.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Идти к:

Абстрактные

Так как тип вируса простого герпеса (ВПГ) инфекции на прогноз и последующее консультирование, тип-специфический тестирования различать HSV-1 от HSV-2 всегда рекомендуется. Хотя ПЦР не было диагностики стандартным методом HSV инфекций центральной нервной системы, до сих пор вирусной культура была методом выбора для HSV генитальной инфекции. Тем не менее, ВПГ ПЦР, с его последовательно и существенно более высокой скоростью обнаружения ВПГ, может заменить вирусной культуры в качестве золотого стандарта для диагностики генитального герпеса у людей с активной слизистых поражений, независимо от анатомической локализации или вирусной типа. Кроме того, обнаружение антигена-тест иммунофлюоресценции или иммуноферментного из образцов от больных с симптомами - могут быть использованы, но определение ВПГ имеет важное значение. Тип конкретного серологические на основе гликопротеина G должны быть использованы для обнаружения бессимптомных лиц, но широкое обследование на антитела HSV не рекомендуется. В заключение, быстрое и точное лабораторная диагностика ВПГ теперь стало необходимостью, учитывая сложность в принятии клинического диагноза ВПГ, растущего во всем мире распространенность генитального герпеса и наличия эффективной противовирусной терапии.

Ключевые слова: вирус простого герпеса, генитальный герпес, диагностика

Идти к:

Введение

Основные элементы структуры для диагностики

Вирус простого герпеса типа 1 (HSV-1) и типа 2 (ВПГ-2) большие двухцепочечные ДНК-вирусы семейства Herpetoviridae, alphaherpetovirinae подсемейство [1]. ВПГ-1 и ВПГ-2 разделяют подобную структуру генома, с 40% гомологии последовательности идущих 83% гомологии их белок-кодирующих областей, объясняя многочисленные биологические сходства и антигенной перекрестной реактивности между двумя типами. ВПГ-1 и ВПГ-2 геномы друг кодируют по крайней мере, 80 различных структурных и неструктурных полипептидов, включая, по меньшей мере 10 различных вирусных гликопротеинов большинство которых встроенных в вирусной оболочке (GB, GC, GD, GE, GG, GH, Г. И. , GL, GM, GN) [1]. Большинство реакции антител к HSV-инфекции против этих поверхностных гликопротеинов. Гликопротеин Гб, дс, Б-г и GE запуска мощных иммунных реакций. Некоторые эпитопы, присутствующие на этих гликопротеинов разделяют ВПГ-1 и ВПГ-2, и вызывают значительную степень перекрестной реактивности. Тем не менее, нет перекрестной реактивности между гликопротеина gg1 в ВПГ-1 и ВПГ GG2 в 2-не может быть обнаружен [2], поэтому антитела к гликопротеину этом используются для распознавания типа-серологически. В то время как тип общей ГБ и GD дисплей высокое сходство (85%) гомологии betweengG-1 и GG-2 значительно ниже, представляя общие аминокислоты (AA) идентичность <30%. Причина этого в том, что GG-1 HSV-1 содержит 238 аа, а GG-2 ВПГ-2 включает 699 аа [2]. Кроме того, гликопротеин G огибающей (GG-2) ВПГ-2 расщепляется в мембранно-связанной части (MGG-2) и секретируемого части (СГГ-2). Тем не менее, эпитопы для антител типоспецифических против MGG-2 не находится в той части MGG-2, который отсутствует в GG-1, но в регионе с аа сходства с GG-1. Эта последовательность, расположенная между аа 560 и 573 для ВПГ-2 GG и между аа 80 и 93 для ВПГ-1 GG, осуществляет девять одинаковых остатков между GG-1 и MGG-2 и пять типоспецифических остатков, которые вызывают значительные структурные различия. Это приводит к различной экспозицией основных остатков, используемых для признания и объясняет отсутствие перекрестной реактивности [3].

Другие сходства и различия между геномами ВПГ-1 и ВПГ-2 используются также для генераторов или типа конкретных молекулярных анализов, в том числе генов, кодирующих некоторых гликопротеинами оболочки или ДНК-полимеразы. Консервативный Ген, кодирующий ДНК-полимеразы часто используется для обнаружения или количественного определения обоих типов и на основе нескольких несоответствий между HSV-1 и HSV-2 последовательностей, которые также могут быть использованы для ввода [4,5].

Бремя генитального герпеса

ВПГ-1 и ВПГ-2 являются вездесущими, влияющие как городские, так и отдаленные поселения во всем мире [6]. ВПГ-1 серотипа достигает от 50 до 70% в развитых странах и 100% в развивающихся странах и ВПГ-2 серотипа варьируется от 10 до 40% и может достигать 60-95% ВИЧ-инфицированных и работниц секс-бизнеса.

Классическая модель HSV-1 и HSV-2 инфекции, связанные с устным или половых заболеваний, соответственно, остается правилом в некоторых частях мира, таких, как к югу от Сахары, где ВПГ-1 инфекция остается обязательным внебольничная болезнь в детстве, и ВПГ-2 инфекции, передаваемых половым путем (ИППП) у взрослых.В противоположность этому, дифференциация ВПГ-1 от HSV-2 на основании анатомической месте инфекции далеко абсолютное в развитых странах, доля генитальных язв, связанных с ВПГ-1-инфекции стало преобладающим в некоторых развитых странах [6,7] , Это является результатом как задержки в приобретении устной ВПГ-1 инфекции в начале жизни в развитых странах (оказывающих значительной части молодых людей всегда чувствительны к половых ВПГ-1-инфекции в инициации половой активности) и орально-генитальный половой практики. Эта функция в отношении в отношении неонатального герпеса, учитывая, что риск вертикальной передачи ВПГ выше при первичной инфекции, чем при реактивации [8], и что ВПГ-1 представляется более легко передаваться новорожденному, чем ВПГ-2 [9]. Следует отметить, что генитальный ВПГ-1-инфекции не предотвращает риск половых приобретения HSV-2 [9].

Во всем мире, ВПГ-2 остается основной причиной генитального герпеса и является основным этиологии язвенной болезни половых. Кроме того, ВПГ-2 инфекции была доказана, чтобы быть независимым кофактором передачи ВИЧ половым путем. В свою очередь, ВИЧ-1 инфекции увеличивает частоту ВПГ-2 реактивации и слизистой пролития, а также количество пролитой вирусов [7]. В тяжелым иммунодефицитом, ВИЧ-1-инфицированных пациентов и пациентов после трансплантации, HSV инфекции часто присутствующих в виде хронических, некротические, расширенной и сливной слизистых изъязвления.

Большинство первичных половых инфекций с HSV-1 и HSV-2 протекает бессимптомно, и все они следуют латентной инфекции нервных клеток в спинной ганглиев и только 10-25% людей с ВПГ-2 антител были осведомлены о своих генитального герпеса. Тем не менее, большая часть пациентов серопозитивных бессимптомных пролить представить эпизоды, которые способствуют распространению этих инфекций [10,11].

Важность лабораторной диагностики и тестирования для генитального герпеса

Генитальная герпетическая инфекция, в основном, диагноз на основании клинических, особенно, когда клиническая картина является классической, с наличием типичных папулезными поражений прогрессирующей для везикул и язвенных поражений, которые, наконец, кора, связанный с местным аденит и в периодических случаев предшествует продромальной [12] ( Фигура 1). Однако клинический диагноз генитального герпеса может быть ограничен в точности. Клиническая дифференциация половых ВПГ-инфекции от других инфекционных (Treponemapallidum, Haemphilusducreyi) и неинфекционных этиологии генитального язвы часто трудно и лабораторное подтверждение инфекции должны быть всегда стремились [13]. Кроме классических везикулярного поражений, HSV генитальной инфекции может быть связано с другими клинически атипичных. Они включают в себя ни необычные сайты (экстрагенитальные регионы: ягодицы, бедра) или атипичные морфологические формы половых органов (вульвы, пениса или перианальных трещин, локализованные периодические покраснения, рецидивирующий корневых или боли в пояснице, цистит, уретрит, выделения из влагалища без явных половых поражений) [14,15]. Менингит может наблюдаться во время фаз первичной инфекции и реактивации, а также может запутать диагноз инфекции половых органов HSV [16]. Соответственно, опора исключительно на клинической диагностики может приводить как к ложноположительных и ложноотрицательных диагностики состояния. Таким образом, клинический диагноз генитального герпеса должен быть подтвержден лабораторными тестами [6,12,17-19].

Клиническое течение первичных генитального герпеса.

Лабораторная диагностика генитального герпеса рекомендуется в различных ситуациях:

• Подтверждение клинически подозреваемых генитального герпеса.

• Переменная презентация генитального герпеса.

• Дополнительное-генитальные осложнения генитального герпеса [20].

• Дифференциальная диагностика с другими язвенного ИППП.

• Дифференциальная диагностика с другими половых язвенных дерматозов (болезнь Крона, синдром Бехчета или фиксированной извержения наркотиков).

Потому что ВПГ-1 стал частым этиологии генитального герпеса, виды набрав также является краеугольным камнем генитального герпеса диагностики. Будь генитальный герпес вызывается ВПГ-1 или ВПГ-2 влияет прогноза и консультирования. Даже если до 50% от первого эпизода случаев генитального герпеса вызваны HSV-1, рецидивы и субклиническое выделение вируса гораздо менее часто генитального ВПГ-1-инфекции, чем половых ВПГ-2. Таким образом, информация о ли одним заражены HSV-1 или HSV-2 может оказаться полезным при обсуждении рисков для рецидива.

Лабораторные методы диагностики для прямого герпеса

Сбор, транспортировка и хранение клинических образцов для диагностики герпеса

ВПГ-1 и ВПГ-2 может быть извлечен путем протирки слизистых генитальных поражений и из ранее участвующих слизистых сайтов у пациентов с бессимптомной инфекции.

Для образца поражений коллекции, небольшой хлопок, хлопок наконечником или лавсана тампон на проволочной оси используется для вирусного культуры, а также молекулярной биологии. Нейлон стекались тампоны может быть предпочтительным, так как их перпендикулярные нейлоновые волокна действуют как мягкой щеткой, чтобы позволить улучшенную коллекцию и освободить из образцов пациентов, хотя никаких формальных проверки для герпеса положительных образцов не была выполнена еще [21-23]. Альгината кальция тампоны являются токсичными для HSV и, следовательно, не должны быть использованы для выделения вируса в культуре клеток [24].

Для активных поражений, сбор везикулярного жидкости или экссудата из мелких пузырьков является методом выбора. После отбора проб, образцы для вирусной культуры, антигена или обнаружения HSV ДНК генома следует сразу помещали в пробирки, содержащие 1 мл соответствующего вирусной транспортной среде, или универсальной транспортной среды, потому что HSV очень чувствительна к высыханию и инактивации рН. Образец также должны быть переданы быстро к диагностическому вирусологической лаборатории на льду (+ 4 ° C), так как вирус инфекционной это термолабильный. Молекулярные анализы, которые не требуют от вирусов заразительность, терпеть менее строгие условия для образца транспорта. Использование транспортной среды может быть не нужно, пока образцы хранятся при + 4 ° С и замораживали до анализа молекулярной. Было показано, что неприемлемое хранения снижению выхода ВПГ ДНК [25] .The уровень вирусных нуклеиновых кислот, полученных от цервиковагинальными промываний остаются стабильными при 4 ° С в течение 24 часов, но значительно уменьшилось, когда они хранились при 20 ° С и 30 ° С [25].

Для диагностики с использованием культуры клеток, употребление алкоголя или йодофоры очистить поражений перед считыванием поражения следует избегать, поскольку это инактивирует вирус.

Рекомендуемые сайты отбора проб и тип образца и методов, которые будут использоваться для диагностики половых инфекций герпеса представлены в таблице 1. Рекомендации для образца транспортировки и хранения, используя микроскопии, культуры и нуклеиновых кислот Амплификации тесты (NAAT) представлены в таблице 2 ,

Рекомендации для образца транспорта Accordin г с методом испытаний, взяты из Домейка и коллег [9]

Лабораторные методы диагностики для прямого герпеса

Несколько тестов с различными особенностей и чувствительности используются для прямого диагностики HSV инфекций (таблица 3).

Прямые лабораторные методы диагностики для HSV

Вирусный культура с дальнейшими герпеса типизации был краеугольным камнем HSV диагностики за последние два десятилетия, и приняты в качестве золотой стандарт для лабораторной диагностики ВПГ инфекции.

Вирусный антиген может быть легко обнаружены прямой иммунофлюоресценции (IF) с помощью анализа меченных флуоресцеином типа-специфических моноклональных антител на мазках, или с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) на мазках. Хотя эти анализы не хватает чувствительности, они выполняют удовлетворительно симптоматических пациентов. Таким образом, эти прямые методы могут предложить быстрый диагностический альтернативу в условиях, когда лабораторная база ограниченных ресурсов, в том числе с ограниченными стран.

Недавно ВПГ обнаружения ДНК основано на амплификации нуклеиновых кислот, и полимеразной цепной реакции (ПЦР), в частности, возникла в качестве альтернативного метода, потому что примерно в четыре раза более чувствительны, меньше зависит от сбора и транспортировки условий, и быстрее, чем вирусной культуры [ 26]. 2010 CDC, передающиеся половым путем Болезни принципы лечения утверждают, что "ПЦР тестирование, чтобы диагностировать герпес может быть выполнена клинических лабораторий, которые разработали свои собственные испытания и провели клиническое Поправка Улучшение лаборатория (ОРСУ) проверка исследование" и "культура и ПЦР ячейки предпочтительными испытания HSV для людей, которые ищут лечение для генитальных язв или других слизистых поражений "(CDC, 2010). С 2011 года три молекулярные анализы были одобрены США продовольствия и медикаментов для тестирования образцов генитальных (IsoAmp ВПГ анализе BioHelix корпорации; Multicode-RTx Вирус простого герпеса 1 и 2 Комплектующие, EraGenBiosciences, Inc .; BD ProbeTec простого герпеса Вирусы (ВПГ I и 2) QX Усиленный ДНК анализы, BD Диагностические системы).

Основываясь на нашей практике, когда молекулярная тестирование доступно, его использование должно быть более предпочтительным, чем вирусной культуры. Молекулярная тестирования также подтверждают распространение вируса или повреждения не присутствуют [27]. При отсутствии средств доступны для проведения культуры клеток или молекул пробы, обнаружение антигена полезно и может обеспечить быстрый диагноз, в основном, когда слизистых поражений присутствуют.

Рекомендуемые сайты и методы, которые будут использоваться в прямом диагностики генитальных поражений герпеса представлены в таблице 4.

Рекомендуемые сайты выборки, тип образца и предпочтительные методы диагностики генитального герпеса, адаптированные из Домейка и коллег [9]

Изоляция Вирус и набрав в культуре клеток

Несколько первичные диплоидные и непрерывные клеточные линии могут быть использованы для выделения ВПГ из клинических образцов. Часто используемые элементы, чувствительные к различным вирусам, включают в себя, главным образом, первичные диплоидные фибробласты человека, такие как MRC-5 клеток, и клеточные линии, такие как Vero клеток (почек обезьян), Нер-2 клеток (гортани плоскоклеточным раком), ребенок хомяка почек и клетки кролика почек [28]. Параллельный инокуляция двух различных клеточных линий может минимизировать эффекты периодических изменений в чувствительности клеток линии.

Культуры клеток впервые разрешат вырасти в сливной монослоя в культуре ткани трубки с одной стороны уплощенные. Цитопатический эффект (ЦПЭ), вызванные HSVusually разрабатывает 24-72 часов после инокуляции, и характеризуется увеличенной, преломляющих и закругленными клеток. Фокусное некроз клеток может происходить и Синцитии и многоядерные гигантские клетки могут присутствовать. В течение нескольких дней, монослой могут быть уничтожены. Время инкубации необходимо соблюдать цитопатический эффект ВПГ зависит от концентрации вируса в клинических образцах образца: с высокими титрами вируса продукции CPE в течение 48 часов, в то время как образцы с низкой концентрацией продукции CPE после 4-6 дней , Культуры должны быть проведены в течение семи до 10 дней. Наиболее высокие темпы изоляции ВПГ, вероятно, если клинические образцы засевают в день они взяты. Важно обратить внимание на условия транспортировки и хранения клинических образцов. Они должны храниться при + 4 ° C во время транспортировки и выдерживают при этой температуре в течение не более чем 48 часов. При температуре окружающей среды, продолжительности перевозки должна быть меньше, чем 4 часа. Если задержка более чем на 48 часов, как ожидается, между сбором и культуры, образцы должны быть заморожены в лучшем при -80 ° С для дальнейшего заражения. Вирусные титры значительно снижена в замороженных и размороженных образцов, и замораживание при -20 ° C не рекомендуется [25].

Подтверждение ВПГ при вирусном культуры, демонстрируя цитопатический эффект рекомендуется, так как другие вирусы могут проявлять цитопатический эффект аналогичный тому, что наблюдается в герпеса культуры, и позволяет печатать вирусной. Типирование ВПГ с использованием культуры клеток могут быть выполнены непосредственно на инфицированных клеточных культур с помощью меченных флуоресцеиномтипа-специфических моноклональных антител с помощью прямой иммунофлюоресценции, который является наиболее практичной, или, в конечном итоге, путем тестирования клеток супернатант молекулярных анализов [28].

В стандартное выделение вируса в культуре ткани может быть медленным, в частности, для образцов с низким титров вируса, многие лаборатории теперь используют центрифугирование с повышенной (Shell флакон) культуры методами в сочетании с окрашиванием типа-специфическое моноклональное антитело до CPE начала снизить вирусную раз изоляции [29,30].Shell флакон культура может снизить вирусную время изоляции от одного до семи дней, чтобы только 16-48 часов.

Генной инженерии линии клеток были разработаны, чтобы позволить раннее обнаружение ВПГ-1 и ВПГ-2, после инкубации в течение ночи. Связанный Вирус Индуцибельная ферментной системы (ELVIS диагностический Гибриды, Inc, США) утилизирует генной инженерии линии клеток, трансфецированные геном индуцируемого промотора HSV связан с геном-репортером anEscherichiacoliLacZ [31]. Репликация ВПГ в этих клетках вызывает производство галактозидазы и инфицированные клетки Стайн синим, когда накладывается с соответствующим субстратом [32]. Ввод может быть выполнена с использованием специфической для данного типа сывороток на любых монослоев, показывая синие клетки.

Диагностика герпетической инфекции с тканевой культуры имеет низкую чувствительность, так как HSV изолирован от поражений примерно в 80% первичных инфекций, но только в 25-50% повторяющихся поражений, а в еще меньше людей, поражения начали лечить. Таким образом, жидкость собрана из неповрежденных пузырей (везикулярное или гнойничковых поражений) будет расти в культуре более 90% времени. К тому времени, поражения уже коркой, только около 25% культур будет положительным. Невозможность обнаружения HSV культурой не указывает на отсутствие герпетической инфекции [26].

Обнаружение антигена

Вирусный антиген может быть легко обнаружены прямой или непрямой иммунофлуоресценции (IF) с помощью анализа меченных флуоресцеином типа-специфических моноклональных антител на мазках, или с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) на мазках. Для обнаружения HSV при поражении чувствительность тесты для выявления антигенов может быть такой же, как культуры анализа, но ниже, чем нуклеиновой кислоты тест амплификации чувствительности [4]. Как косвенное ЕСЛИ анализ и ОВОС удовлетворительно в симптоматических пациентов, эти прямые методы могут предложить быстрый диагностический альтернативу в условиях, когда лабораторные условия ограничены и где образцов обработки и транспортировки условия могут инактивировать вирус. Это верно для отдаленных местах, где длительное время образец транспорт под ненадлежащих условиях может произойти перед поставкой в микробиологическую лабораторию.

Для иммунофлуоресцентных анализов, слайд должен быть подготовлен в лаборатории с использованием метода цитоспиновых гарантировать качество чтения слайдов. Под флуоресцентным микроскопом, инфицированные клетки будут признаны присутствии характерным рисунком яблочного-зеленую флуоресценцию в ядре и цитоплазме базальных клеток и парабазальных.

Несколько ОВОС анализы являются коммерчески доступными, но немногие из них были FDA одобрено.

Обнаружение и количественное Вирус по молекулярной биологии

Молекулярная биология возникла в течение последних десяти лет в качестве привлекательного мощного метода для обнаружения и, возможно, количественно HSV ДНК. Большинство NAATs основаны на ПЦР, но некоторые используют другой подход для амплификации нуклеиновой кислоты.

Несколько процедур были предложены для обнаружения и / или количественного HSV геномы в клинических образцах, в том числе в доме конкурентной ПЦР [33], обнаружения ПЦР с последующим ДНК иммуноферментного анализа гибридизации [34], в режиме реального времени ПЦР [4,5,35 , 36], а также различные коммерчески доступных наборов. Большинство в доме или коммерческой ПЦР ориентации геном HSV в настоящее время на основе ПЦР в реальном времени, что позволяет как обнаружение и количественное определение ДНК ВПГ в клинических образцах. По сравнению с традиционной ПЦР (также называемый конечной точкой ПЦР) показали, как с агарозном геле или миграции фермента гибридизации, ПЦР реального времени быстрее, менее трудоемким с минимальными техническими руки-по времени и более низким риском молекулярных загрязнений. Грунтовки из HSV последовательности ДНК общей для обеих ВПГ-1 и ВПГ-2 [полимеразы, ДНК ВПГ, HSV тимидинкиназы или гликопротеин B] может идентифицировать ДНК ВПГ. В некоторых анализах, кривая плавления в конце ПЦР в реальном времени позволяет различать HSV-1 от HSV-2 [4,5,36]. Праймеры и зонды из HSV последовательности ДНК, характерные для ВПГ-1 или ВПГ-2, в том числе, GB, GD, GG или генов, позволяет также усиление одного конкретного типа герпеса [35,37-40]. В каждом эксперименте положительные и отрицательные контроли должны работать. Кроме того, использование внутреннего контроля шипами, прежде чем кислотную экстракцию нуклеиновых рекомендуется, чтобы обнаружить присутствие каких-либо ингибиторов в амплификации, что может привести к ложноотрицательных результатов.

ПЦР или другие NAATs наиболее чувствительный тест в настоящее время доступны для обнаружения HSV в клинических образцах. Темпы обнаружения ПЦР было показано, что 11-71% превосходит культуры вируса [26,41-44]. Кроме того, NAAT позволяет наилучшим обнаружение бессимптомной пролития генитального герпеса рядом симптоматических инфекций [26]. Тем не менее, отказ обнаружить HSV методом ПЦР не указывает на отсутствие герпетической инфекции, потому что вирусовыделение прерывистый [11].

Три NAATs были одобрены США продовольствия и медикаментов для тестирования образцов генитальных (IsoAmp ВПГ анализе BioHelix корпорации; Multicode-RTx Вирус простого герпеса 1 и 2 Комплектующие, EraGenBiosciences, Inc .; BD ProbeTec вирусами простого герпеса (ВПГ Я и 2) QX Усиленный ДНК Анализы, BD Диагностические системы).

IsoAmp ВПГ анализе используют изотермический хеликазной-зависимой амплификации в сочетании с одноразовой, герметично уплотненной, идентификации полосы вертикальной потока, ограничивающим технические практический время и риск перекрестного загрязнения. После ДНК очищают от образца, анализ имеет общую тест-результирующий времени около 1,5 часов. Диагностическая чувствительность и специфичность сопоставимы с конечной точки ПЦР и превосходят культуры на основе методов. Спектакли не были по сравнению св режиме реального времени ПЦР. Такой анализ FDA одобрило для обнаружения вирусами простого герпеса (HSV) в половых и оральных поражений образцов. Анализ не предоставить конкретную информацию набрав дифференцировать HSV-1 от ВПГ-2. Анализ не предназначен для использования в пренатального скрининга [45].

Multicode-RTx Вирус простого герпеса 1 и 2 Комплект использует ПЦР в реальном времени молекулярную обнаружения. Multicode-RTx технологии сайт-специфически включает в трифосфатisoG, ковалентноприсоединенный к DABCYL жажду, напротив качестве базы ISOC, которая примыкает к флуоресцентной метки 5 'в одном из праймеров. ПЦР-амплификацию проводили с использованием РошLightCycler 1.2 инструмент. Включение гасящего меченных нуклеотидов приводит к снижению флуоресценции анализа, когда продукт представляет собой молекулу двухцепочечной ДНК. ПЦР-праймеры целевой типоспецифической последовательность ДНК в гене вируса простого герпеса гликопротеина B. Multicode-RTx Вирус простого герпеса 1 и 2 Комплект указывается для использования в обнаружении и набрав ВПГ-1 или ВПГ-2 ввагинальных мазков поражения образцов из симптоматических пациенток. Анализ при аналогичной чувствительность и специфичность по сравнению с двумя другими коммерческими реального времени ПЦР на образцах CSF [46].

BD, ProbeTec вирусами простого герпеса (ВПГ-1 и -2) QX Усиленный Анализ ДНК является полностью автоматизированной тест для ВПГ-1 и ВПГ-2 молекулярной обнаружения и печатать на системе Viper ™ BD. ПЦР-праймеры целевой типоспецифической последовательность ДНК в гене гликопротеина G HSV. Он одобрен для выявления и дифференциации ВПГ-1 и ВПГ-2 в образцах аногенитальных. Он был по сравнению с HSV культуры и лаборатории развитых в режиме реального времени ПЦР с 508 клинических образцов. Чувствительность ВПГ-2 составляла от обнаружения 98.4-100% в зависимости от аналитического подхода, в то время как специфичность варьировались от 80,6%, по сравнению с менее чувствительной способа культивирования, чтобы 97,0%, по сравнению с ПЦР. Для ВПГ-1, чувствительность и специфичность диапазоны были 96.7-100% и 95.1-99.4% соответственно [47].

Косвенное серологические диагностика герпетической инфекции

Обнаружение HSV-IgG специфических антител может быть сделано несколькими чутко иммунологических методов. Серологические диагноз ВПГ инфекции и HSV типа конкретного тестирования на антитела представлены в таблице 5, и коммерчески доступные анализы одобрен пищевых продуктов и медикаментов (FDA, США) в таблице 6. Точные типоспецифических HSV серологических анализов на основе Обнаружение HSV-специфического gg1 (HSV-1) и GG2 (HSV-2) с использованием антител родной, очищенный или рекомбинантный gg1 или GG2 как антигены. Серологические анализы, основанные на антиген препаратов из всего вируса или из смесей сырой инфицированных клеток белка обнаружить преимущественно типа-общие антитела, могут иметь низкую чувствительность в выявлении ВПГ-2 антитела в ВПГ-1-серопозитивных пациентов, или может неправильно ввести антитела в пациентах с Только ВПГ-1 или ВПГ-2-инфекции. Некоторые коммерческие анализы, описанные как "тип-специфический" на самом деле основаны на относительной реакционной способности сывороточных антител к сырой препаратов ВПГ-1 в сравнении с ВПГ-2 антигенов. Точность таких испытаний для обнаружения ВПГ-2 антител является низкой по сравнению с тестами гликопротеин G-основе, и их использование не рекомендуется [48].

Коммерчески доступные серологические анализы для диагностики ВПГ, утвержденные пищевых продуктов и медикаментов (США) (FDA, 2013)

Тип конкретного IgG антитела отрицательны в начале презентации заболевания герпеса, и стать обнаружить две недели до трех месяцев после появления симптомов и сохраняются на неопределенный срок. Таким образом, сразу же после заражения существует "окно", в котором тест на антитела к даст отрицательный результат. Следовательно, первичные инфекции HSV могут быть задокументированы с использованием любых методов серологические, чтобы показать сероконверсии с парных сывороток. ВПГ IgM тестирования значительно повысил способность обнаруживать раннюю инфекцию у больных, которые не имеют детектируемого IgG, но может быть отрицательным в течение основного заболевания. Тестирование IgM и может быть положительным при реактивации заболевания и не могут быть использованы, чтобы отличить главное от повторной инфекции. Из-за этих ограничений, тестирование HSV IgM имеет ограниченную доступность в обычных диагностических параметров и не может быть рекомендован в клинической практике.

Золотой стандарт некоммерческие тесты для ВПГ-2 включают иммунодот ферментного анализа (разработанной в Университете Эмори, Атланта, Джорджия, США), в Западной теста блот (разработанной в Университете Вашингтона (UW-WB)), и моноклональноеантитело блокируя иммуноферментного анализа (разработанный Центральной лабораторией общественного здравоохранения, Лондон, Соединенное Королевство) [49,50]. Эти тесты используются в соответствующих специализированных справочных лабораторий, но не повторится во многих местах, ограничивая тем самым их пригодность для крупномасштабных эпидемиологических исследований. Тест UW-WB был использован в качестве золотого стандарта в нескольких исследованиях, в том числе оценки коммерческих серологических анализах, необходимых для одобрения ФДА и в оценке работы других золота стандартных тестов. Несмотря на отличную производительность, Вестерн-блот-прежнему в первую очередь инструментом исследования. В настоящее время, Вестерн-блот не FDA одобрено, и требует высокого уровня технической возможности, времени и средств, чтобы выполнить.

Тип конкретного HSV гликопротеин G (GG) основе ИФА стал коммерчески доступным в 1999 году чувствительности этих тестов тип GG конкретных для обнаружения ВПГ-2 антитела варьируются от 80-98%, а ложно-отрицательные результаты могли бы быть более часто на ранних стадиях инфекции [51]. В особенности этих анализов являются ≥96%. Тесты одобрены для использования в США есть чувствительность 97-100% и специфичность 94-98%, при измерении по сравнению с вестерн-блоттинга. Ложно-положительные результаты могут возникать, особенно у больных с низкой вероятностью ВПГ-инфекции. Повторите или подтверждающее тестирование может быть указано в некоторых ситуациях, особенно если недавнее приобретение генитального герпеса подозревается [51]. Некоторые штаммы ВПГ-2 были идентифицированы с мутациями или делеции в гене GG2-либо ведущих с отсутствием GG-2 экспрессии или производства усеченных форм [52,53]. Инфекции, таких вариантов вызвало генитальные поражения, подобные диким ВПГ-2 инфекции, но иммунного ответа на GG-2 были либо снижается или отсутствует [52,53]. Отрицательный обнаружения типоспецифических ВПГ-2 антител не исключает редкий возможность ВПГ-2 инфекции. ВПГ-2 Обнаружение ДНК или ВПГ-2 выделение в культуре клеток наряду с отрицательным серологических за первичной инфекции предполагает инфекцию с GG-2 дефицитной ВПГ-2 штамма.

Тесты HerpeSelect® ELISA (ИФА HerpeSelect® 1 IgG Вирус простого герпеса-1 (HSV-1) ИФА IgG; HerpeSelect® 2 ИФА IgG Вирус простого герпеса-2 (ВПГ-2) ИФА IgG, Фокус Technologies, Inc., кипарис, Калифорния [ранее MRL Диагностика]) являются FDA одобрено, широко доступны и были широко изучены [51,54-57].

Точка-в-санитарной быстрые тесты могут также предоставлять результаты для ВПГ-2 антител из капиллярной крови или сыворотки во время визита в клинику. Эти иммунологические предназначены для использования капиллярной крови из прокола в пальце (или сыворотки) и обычно используют боковую поток сыворотке через мембрану, содержащие точку из gg1 или GG2 антигена.При сыворотки наносят на комплект, визуальный изменение цвета развивается (розовый точка), если герпес антитела присутствуют. Несмотря на отчетный между оперативной изменчивости 5-10% в тестовом интерпретации, эти точки из-санитарной тесты выполнить относительно хорошо с чувствительностью ≥91% и специфичность ≥94% [48]. Основным преимуществом точка-в-санитарной анализов является то, что они дают результаты быстро (потенциально в то время как пациент все еще находится в клинической сайте,), позволяющий более своевременно образования и консультирования пациентов. Основным недостатком этих тестов является их стоимость по сравнению с системами герпеса ИФА на основе.

Если генитальные поражения присутствуют, тип конкретных серологические и прямой вирус тестирование может помочь установить, если эпизод новой инфекции ВПГ или реактивация (таблица 7).

Вирусологические и серологические подход к ВПГ-2 в диагностике присутствии и в отсутствие генитальных поражений, адаптированный Гупта и его коллеги [5]

Тип конкретного HSV антитела может занять от 2 недель до 3 месяцев, чтобы развиваться. Таким образом, у человека с приобретенных герпеса начальное отсутствие IgG антител, специфичных к GG и последующее развитие таких антител после 12 недель подтверждает новый инфекции HSV.

Идти к:

Рекомендации

Уитли RJ, Ройзман Б. вирус простого герпеса инфекции. Ланцет. 2001 года; 357: 1513-1518. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (00) 04638-9. [PubMed] [перекрестная ссылка]

McGeoch ди-джей, Мосс HW, МакНаб D, Кадр MC. Последовательность ДНК и генетического содержание л региона HindIII в краткосрочной уникальной составляющей вируса простого герпеса 2 типа генома: идентификация гена, кодирующего гликопротеин G, и эволюционные сравнения. J GenVirol. 1987; 68 (Pt 1): 19-38. [PubMed]

TunbäckР, Т Бергстрем, Löwhagen Гб, Hoebeke J, Liljeqvist JA. Тип-специфическую реактивность анти-гликопротеин G антитела из вируса простого герпеса-инфицированных поддерживается одним или двумя остатками типоспецифических. J GenVirol. 2005 года; 86 (Pt 2): 247-251. [PubMed]

Берроуз J, ниче А, Б Бейли, Уокер Е, G Хиггинс, Т. Кок Обнаружение и подтипы вируса простого герпеса в клинических образцах по LightCycler ПЦР, иммуноферментного анализа и культуры клеток. BMC Microbiol. 2002 года; 2: 12. DOI: 10,1186 / 1471-2180-2-12. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Легофф J, Bouhlal Н, Grésenguet G, H Вайс, Khonde N, Hocini Н, Дезире N, Si-Мухаммед А, де ДьеЛонго J, Chemin С, Е Мороз, Pépin J, Малкин JE, MayaudР, Běleč Л. Недвижимость -время ПЦР количественное половых пролития вируса простого герпеса (HSV) и вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) у женщин, коинфицированных ВПГ и ВИЧ. J ClinMicrobiol. 2006 года; 44: 423-432. DOI: 10,1128 / JCM.44.2.423-432.2006. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Р. Гупта, Уоррен Т, Вальд А. Генитальный герпес. Ланцет. 2007 года; 370: 2127-2137. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (07) 61908-4. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Бернштейн Д. И., Беллами А.Р., Крюк EW 3-й, Левин MJ, Вальд A, Юэлл М. Вольф П., курс CD, Хейнеман ТС, Дубин G, Belshe РБ. Эпидемиология, клиническая картина, и антитела ответ на первичной инфекции вирусом простого герпеса типа 1 и типа 2 в молодых женщин. ClinInfectDis. 2013 года; 56: 344-351. DOI: 10,1093 / CID / cis891. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Браун З.А., Вальд A, Морроу РА, Selke S, J Це, Кори Л. Влияние серологического статуса и кесарева сечения на скорость передачи вируса простого герпеса от матери к ребенку. JAMA. 2003 года; 289: 203-209. DOI: 10,1001 / jama.289.2.203. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Браун Л., Gardella С, G Мальм, Prober CG, Forsgren М, Кранц Е.М., Арвин А.М., Yasukawa Л.Л., Мохан К, коричневый Z, Кори л, Вальд А. Влияние материнской вирусом простого герпеса (ВПГ) и серологический статус HSV типа на Риск неонатального герпеса.ActaObstetGynecolScand. 2007 года; 86: 523-529. DOI: 10,1080 / 00016340601151949. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Wald А, Це J, S Selke, Уоррен Т, Ryncarz А.Ю., Эшли R, Кригер Ю.Н., Кори Л. Возобновление половых вируса простого герпеса типа 2 инфекции у бессимптомных серопозитивных лиц. N Engl J Med. 2000; 342: 844-850. DOI: 10,1056 / NEJM200003233421203. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Tronstein Е, С Джонстон, Хуан М.Л., Selke S, Magaret А, Уоррен Т, Кори л, Вальд А. Половой пролития вируса простого герпеса среди симптоматических и бессимптомных лиц с ВПГ-2 инфекции. JAMA. 2011 года; 305: 1441-1449. DOI: 10,1001 / jama.2011.420. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Кори л, Вальд А. В: заболевания, передающиеся половым. 4. Холмс К.К., Спарлинг ПФ, Штамм мы ПиотР, Wasserheit JW, Кори л, Коэн М, редактор. Нью-Йорк: McGrawHill, 2008. Генитальный герпес; стр. 399-437.

ДиКарло РП, Мартин DH. Клинический диагноз генитального язвенной болезни у мужчин. ClinInfectDis. 1997; 25: 292-298. DOI: 10,1086 / 514548. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Cusini М, Гисланцони М. Важность диагностики генитального герпеса. J AntimicrobChemother. 2001 года; 47 Дополнение Т1: 9-16. [PubMed]

Лаутеншлагер S, Эйхман А. уретрит: недооценивается клинический вариант генитального герпеса у мужчин? J AmакадDermatol. 2002 года; 46: 307-308. DOI: 10,1067 / mjd.2002.117857. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Бергстрем Т, Vahlne А, Alestig К Jeansson S, M Forsgren, Lycke Е. Первичные и рецидивирующие вирусом простого герпеса типа 2-индуцированной менингит. J InfectDis. 1990; 162: 322-330. DOI: 10,1093 / infdis / 162.2.322. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Кимберли А, Workowski доктор медицинских наук, Левин туалет. Венерические заболевания принципы лечения 2002 Центры по контролю и профилактике заболеваний. MMWR Рекоменд Вес 2002 года; 51:. 1-78.

Домейка М, М Башмакова, Савичева А, Коломиец N, Соколовский Е, Халлен А, Unemo М, Баллард RC. Европейская сеть Восточной сексуального и репродуктивного здоровья (СРЗ EE сети) Руководящие принципы для лабораторной диагностики генитального герпеса в странах Восточной Европы. Евро Surveill. 2010 года; 15 [PubMed]

Ван Вагонер Нью-Джерси, Крюк EW 3-й. Герпес диагностические тесты и их использование. Тек InfectDisRep 2012 года; 14:. 175-184. DOI: 10.1007 / s11908-012-0241-0. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Симмонс А. Клинические проявления и лечение соображения вируса простого герпеса инфекции. J InfectDis. 2002 года; 186 (Дополнение 1): S71-77. [PubMed]

Debyle СBulkow л, Miernyk К Chikoyak л, Гуммель КБ, Хеннесси Т, Синглтон Р. Сравнение носоглотки стекались тампоны и носоглотки методы сбора стирки для обнаружения дыхательного вируса в госпитализированных детей с использованием ПЦР в реальном времени. J Virol методы. 2012 года; 185: 89-93. DOI: 10.1016 / j.jviromet.2012.06.009. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Dezzutti CS, Хендрикс CW, Marrazzo JM, Пан Z, Ван L, N Louissaint, Kalyoussef S, Торрес Н.М., Хладик Ж, Парих U, J Меллорс, Хиллер С.Л., Герольд до н. Выполнение тампоны, промывания и разбавителей для количественного биомаркеров женских половых органов растворимых слизистой посредников.PLoSOne. 2011 года; 6: e23136. DOI: 10.1371 / journal.pone.0023136. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Уолш Р, Овермайер CL, Фам К Михельсона S, Гофман л, DeSalvia л, Тран Т, Д Гонсалес, Pusavat J, Feola М, Иаконо КТ, Мордехай Е, Адельсон меня. Сравнение интенсивности дыхания обнаружения вируса для младенцев и детей ясельного по использованию тампонов, стекались засоленных аспиратов и засоленных аспиратов смешанных вуниверсальной транспортной среды для хранения при комнатной температуре и судоходства. J ClinMicrobiol. 2008 года; 46: 2374-2376. DOI: 10,1128 / JCM.00714-08. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Кран Л.Р., Гуттерман ПА, Часовня Т, Лернер М.. Инкубационный мазков материалов с вирусом простого герпеса. J InfectDis. 1980; 141: 531. DOI: 10,1093 / infdis / 141.4.531. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Легофф J, Тантон СLecerf М, G Grésenguet, Нзамби К Bouhlal Н, Н Вайс, Л. Belec ANRS1212 Исследовательская группа. Влияние температуры хранения на стабильность РНК ВИЧ-1 и HSV-2 ДНК в цервиковагинальными выделений, собранных промывание влагалища. J Virol методы. 2006 года; 138: 196-200. DOI: 10.1016 / j.jviromet.2006.07.013. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Wald А, Хуанг М.Л., Каррелл D, S Selke, Кори Л. полимеразной цепной реакции для обнаружения вируса простого герпеса (HSV) ДНК по поверхности слизистой оболочки: сравнение с изоляцией HSV в клеточной культуре. J InfectDis. 2003 года; 188: 1345-1351. DOI: 10,1086 / 379043. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Стрик Л.Б., Вальд А. Диагностика длявирусом простого герпеса: есть ПЦР новый золотой стандарт? МолDiagnTher. 2006 года; 10: 17-28. DOI: 10.1007 / BF03256439. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ustaçelebi С. Диагностика вирус простого герпеса инфекций. J Clin Virol. 2001 года; 21: 255-259. DOI: 10.1016 / S1386-6532 (00) 00168-2. [PubMed] [перекрестнаяссылка]

Bonville Калифорния, ФорбсБ.А., Bartholomä N, МакмилланЮ.А., Вайнер LB. Быстрое обнаружение вируса простого герпеса в клетках MRC-5 клеток с помощью низкоскоростного центрифугирования и повышение иммунопероксидазой окрашивания 16 ч после прививки. DiagnMicrobiol Инфекция Дис. 1987; 8: 251-254. DOI: 10,1016 / 0732-8893 (87) 90057-5. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Зима Г.Ф., Инглис JM, Cubie га. Экспресс-диагностика вируса простого герпеса инфекций вобычных и выложить культур клеток, используя флакон моноклональных антител. J Virol методы. 1987; 15: 329-330. DOI: 10,1016 / 0166-0934 (87) 90156-X. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Stabell ЕС, Оливо ПД. Выделение клеточной линии для быстрого и чувствительного анализа гистохимических для обнаружения вируса простого герпеса. J Virol методы. 1992; 38: 195-204. [PubMed]

Stabell ЕС, О'Рурк SR, Шторх А., Оливо ПД. Оценка генной инженерии линии клеток и гистохимические бета-галактозидазы анализ для выявления вируса простого герпеса в клинических образцах. J ClinMicrobiol. 1993; 31: 2796-2798. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Хобсон А, Вальд A, N Райт, Кори Л. Оценка количественного конкурентного ПЦР для измерения содержания ДНК вируса простого герпеса в секрете половых путей. J ClinMicrobiol. 1997; 35: 548-552. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Mbopi-Kéou FX, G Grésenguet, MayaudР, Вайс HA, Гопал R, Матта М, Павел JL, Браун DW, Хейс RJ, Mabey постоянного тока, Běleč L. Взаимодействие между вирусом простого герпеса типа 2 и вирус иммунодефицита человека типа 1 инфекции в Африканские женщины: возможности для вмешательства. J InfectDis. 2000; 182: 1090-1096. DOI: 10,1086 / 315836. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ryncarz AJ, J Годдард, Вальд A, Хуан М.Л., Ройзман В, Кори Л. Развитие высокой пропускной количественного анализа для обнаружения вируса простого герпеса ДНК в клинических образцах. J ClinMicrobiol. 1999; 37: 1941-1947. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Espy МЮ, Уль-младший, Митчелл PS, Thorvilson Ю.Н., Svien К.А., Уолд Д., Смит TF. Диагностика простого герпеса вирусных инфекций в клинической лаборатории по LightCycler ПЦР. J ClinMicrobiol. 2000; 38: 795-799. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Whiley Д.М., Маккей М., Syrmis МВт, Витт МЮ, Sloots ТП. Обнаружение и дифференциация вирусов простого герпеса типов 1 и 2 на дуплекс LightCycler ПЦР, который включает в реакцию внутреннего контроля ПЦР. J ClinVirol. 2004 года; 30: 32-38. DOI: 10.1016 / j.jcv.2003.08.003. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Меилан S, D Роберт, Эстрада СGrimbuehler В, Петер О, Меилан PR, Сали Р. ПЦР в реальном времени для конкретного типа идентификации простого герпеса в клинических образцах: оценка типоспецифических результатов в контексте заболеваний ЦНС. J ClinVirol. 2008 года; 41: 87-91. DOI: 10.1016 / j.jcv.2007.10.010. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Адельсон ME, Feola М, Трама J, Тилтон RC, Мордехай Е. Одновременное обнаружение вирусных герпеса типов 1 и 2 по ПЦР в реальном времени и Пиросеквенирование. J ClinVirol. 2005 года; 33: 25-34. DOI: 10.1016 / j.jcv.2004.09.022. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Фан XF, песни B, Ту ГГ, Тонг ЮЖД, Faul JL, Бай Х. Быстрое обнаружение гликопротеина G гена для диагностики и типирования вируса простого герпеса, генитального герпеса в. Секс передач Инфекция. 1999; 75: 396-397. DOI: 10.1136 / sti.75.6.396. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Geretti утра. Генитальный герпес. Секс передач Инфекция. 2006 года; 82 Дополнение 4: iv31-34. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Geretti М. Браун DW. Национальное исследование диагностических услуг для генитального герпеса. Секс передач Инфекция. 2005 года; 81: 316-317. DOI: 10.1136 / sti.2004.013110. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Рамасвами М, Макдональд С, М Смит, Томас D, S Максвелл, Арендатор-Цветы М, Geretti утра. Диагностика генитального герпеса по ПЦР в реальном времени в клинической практике. Секс передач Инфекция. 2004 года; 80: 406-410. DOI: 10.1136 / sti.2003.008201. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Scoular А, Гиллеспи G, Карман WF. Полимеразной цепной реакции для диагностики генитального герпеса вмочеполовой медицины клиники. Секс передач Инфекция. 2002 года; 78: 21-25. DOI: 10.1136 / sti.78.1.21. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ким HJ, Тонг УТан Вт, Quimson л, Коуп В.А., Pan X, A, МотрэKong R, Hong J, D, Кона Miller NS, Полтер MD, Гонконг H, ТанYw, Йен-Либерман В. быстрого и просто изотермический тест амплификации нуклеиновых кислот для обнаружения вирусных герпеса типов 1 и 2. J ClinVirol. 2011 года; 50: 26-30. DOI: 10.1016 / j.jcv.2010.09.006. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

SelvarajuСО, Колбаса М, Хорват РТ, Selvarangan Р. Оценка трех анализируемых конкретных реагентов для выявления и типирования вируса простого герпеса в спинномозговой жидкости. DiagnMicrobiol Инфекция Дис. 2009 года; 63: 286-291. DOI: 10.1016 / j.diagmicrobio.2008.11.013. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ван-дер-Б, Уоррен Т, Тейлор С.Н., Мартенс М, Джером К. Р., Мена л, Лебедь J, S Ginde, Изысканные Р, Крюк EW 3-й. Тип конкретного идентификация аногенитальной вирус простого герпеса инфекций с использованием имеющихся в продаже реагентов амплификации нуклеиновых кислот. J ClinMicrobiol. 2012 года; 50: 3466-3471. DOI: 10,1128 / JCM.01685-12. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Wald А, Эшли Р. Морроу серологическое тестирование на вирус простого герпеса (ВПГ) -1 и ВПГ-2 инфекции. ClinInfectDis. 2002 года; 35 (Дополнение 2): S173-182. [PubMed]

Эшли Свобода. Сортировка испытания нового типа ВПГ конкретных антител. Секс передач Инфекция. 2001 года; 77: 232-237. DOI: 10.1136 / sti.77.4.232. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Сломка МЮ Эшли Р. Коуэн FM, Крест, Браун DW. Моноклональные антитела блокируют тесты для выявления ВПГ-1 и ВПГ-2-специфических гуморальных ответов: сравнение с западнойблоттинга. J Virol методы. 1995; 55: 27-35. DOI: 10,1016 / 0166-0934 (95) 00042-S. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Легофф J, Mayaud Р, Gresenguet G, Вайс HA, Нзамби К Мороз Е, Пепин J, Belec Л. АНРС 12-12 Исследовательская группа. Выполнение HerpeSelect и Калян анализов в обнаружении антител к вирусу простого герпеса типа 2. J ClinMicrobiol. 2008 года; 46: 1914-1918. DOI: 10,1128 / JCM.02332-07. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Daikoku Т, Хориба К Кавана Т, Хирано М, Шираки К. Роман удаление в гликопротеина G образует кластер и вызывает эпидемиологическую распространение вируса простого герпеса типа 2 инфекции. J MedVirol. 2013 года; 85: 1818-1828. DOI: 10.1002 / jmv.23668. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Liljeqvist JA, Svennerholm B, Бергстрем Т. Вирус простого герпеса типа 2 гликопротеин G-отрицательные клиническихизолятов генерируются одиночные мутации сдвига рамки считывания. J Virol. 1999; 73: 9796-9802. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Эшли Р., Ву л, Пикеринг JW, Ту MC, Schnorenberg Л. Премаркет оценка коммерческой гликопротеина G на основе иммуноферментного анализа для герпеса типа-специфических антител простого герпеса. J ClinMicrobiol. 1998; 36: 294-295. [PMC бесплатно статья] [PubMed]

Морроу РА, Фридрих D, Е. Кранц Производительность фокуса и Калон иммуноферментного анализов на антитела к вируса простого герпеса типа 2 гликопротеина G в культурно-документально случаев генитального герпеса. J ClinMicrobiol. 2003 года; 41: 5212-5214. DOI: 10,1128 / JCM.41.11.5212-5214.2003. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Biraro S, MayaudР, РА Морроу, Grosskurth Н, Вайс га. Производительность вирусных коммерческий простого герпеса 2-го типа тестов антител с использованием образцов сыворотки от Африки южнее Сахары: систематический обзор и мета-анализ. Секс передач Дис. 2011 года; 38: 140-147. DOI: 10,1097 / OLQ.0b013e3181f0bafb. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ван Дейк Е, BUVE А, Вайс HA, Глинн JR, Браун DWG, Де Deken B, Парри J, Хейс RJ. Производительность имеющихся в продаже иммуноферментных для выявления антител против вируса простого герпеса типа 2 в африканских популяций. J ClinMicrobiol. 2004 года; 42: 2961-2965. DOI: 10,1128 / JCM.42.7.2961-2965.2004. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Росс КДжонстон С, Вальд А. Вирус простого герпеса типа 2 испытания серологические и психосоциальной вреда: систематический обзор. Секс передач Инфекция. 2011 года; 87: 594-600. DOI: 10.1136 / sextrans-2011-050099. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Делани S, Gardella СDaruthayan С Сарацино М, L Drolette, Кори л, Вальд А. проспективногокогортного исследования партнерской проверки на вирус простого герпеса и сексуального поведения во время беременности. J InfectDis. 2012 года; 206: 486-494. DOI: 10,1093 / infdis / jis403. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Пирет J, Буавен Г. Устойчивость вирусов герпеса нуклеозида аналогов: механизмы, распространенность и управление. Antimicrob Агенты Chemother. 2011 года; 55: 459-472. DOI: 10,1128 / AAC.00615-10. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Бэкон TH, Левин MJ, Лири JJ, Sarisky РТ, Саттон Д. Герпес сопротивление вируса ацикловир и пенцикловира после двух десятилетий противовирусной терапии. ClinMicrobiolПреподобный 2003 года; 16: 114-128. DOI: 10,1128 / CMR.16.1.114-128.2003. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Морфин Ж, Тувено Д. Вирус простого герпеса сопротивление противовирусных препаратов. J ClinVirol. 2003 года; 26: 29-37. DOI: 10.1016 / S1386-6532 (02) 00263-9. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Андрей G, Georgala А, D Topalis, FitenР, Аун М, G Opdenakker, Snoeck Р. Неоднородность и эволюция тимидинкиназы и ДНК-полимеразы мутантов вируса простого герпеса типа 1: последствия для противовирусной терапии. J InfectDis. 2013 года; 207: 1295-1305. DOI: 10,1093 / infdis / jit019. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Баррел S, Deback С, Н Agut, Boutolleau Д. Генотипическая характеристика UL23 тимидинкиназы и ДНК-полимеразы UL30 клинических изолятов вируса простого герпеса: натуральный полиморфизма и мутаций, связанных с устойчивостью к противовирусным препаратам. Antimicrob Агенты Chemother. 2010 года; 54: 4833-4842. DOI: 10,1128 / AAC.00669-10. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Sauerbrei А, Deinhardt S, R Целль, Wutzler П. Фенотипическая и генотипической характеристики ацикловир устойчивостью клинических изолятов вируса простого герпеса. ПротивовирусныеRes. 2010 года; 86: 246-252. DOI: 10.1016 / j.antiviral.2010.03.002. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Sauerbrei А, Liermann К Bohn К, Henke А, Целль R, S Gronowitz, Wutzler П. Значение аминокислотных замен в гене тимидинкиназы вируса простого герпеса типа 1 для сопротивления. ПротивовирусныеRes. 2012 года; 96: 105-107. DOI: 10.1016 / j.antiviral.2012.08.001. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Ван У, Ван Вопрос, Чжу Вопрос, Чжоу R, Лю Дж, Пенг Т. Идентификация и характеристика ацикловир устойчивостью клинической ВПГ-1, выделенных от детей. J ClinVirol. 2011 года; 52: 107-112. DOI: 10.1016 / j.jcv.2011.06.009. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Чэнь S-Н, Пирсон А, Коэн Д., Чэнь S-Н. Отказ Тимидинкиназа отрицательным вирусом простого герпеса активировать с задержкой после эффективного учреждения. J Virol. 2004 года; 78: 520-523. DOI: 10,1128 / JVI.78.1.520-523.2004. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Коэн Д., Kosz-Vnenchak М, Якобсон Ю.Г., Лейб Д.А., Богард CL, Шаффер ПА, Тайлер К.Л., Книпе ДМ. Тимидинкиназа отрицательным вирус простого герпеса мутанты установить задержку в мыши тройничного ганглиев, но не активировать. Труды Natl Изд-во АН U S А. 1989; 86: 4736-4740. DOI: 10.1073 / pnas.86.12.4736. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Kriesel JD, Спруанс С.Л., Причард М, Паркер Ю.Н., Керн ЭР. Периодические противовирусное устойчивостью генитальный герпес в иммунокомпетентных пациента. J InfectDis. 2005 года; 192: 156-161. DOI: 10,1086 / 430612. [PMC бесплатно статья] [PubMed] [перекрестная ссылка]

Horsburgh до н.э., Чэнь SH, Ху А, Mulamba Гб, Бернс WH, Коэн Д.. Периодические ацикловир устойчивостью вируса простого герпеса в ослабленным иммунитетом пациента: может напрячь различия компенсировать потерю тимидинкиназы в патогенезе? J InfectDis. 1998; 178: 618-625. DOI: 10,1086 / 515375. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Морфин F, D Тувено, Aymard М, Souillet Г. Возобновление ацикловир устойчивостью тимидинкиназы-дефицитной вируса простого герпеса, несущим одного вставку в базовую 7 Gsгомополимера повторения гена тимидинкиназы. J MedVirol. 2000; 62: 247-250. DOI: 10,1002 / 1096-9071 (200010) 62: 2 <247 :: АИД-JMV17> 3.0.CO; 2-V. [PubMed] [перекрестная ссылка]

Статьи из журнала вирусологии приведены здесь любезно БМЦ

Поиск по сайту: