Помощничек
Главная | Обратная связь


Археология
Архитектура
Астрономия
Аудит
Биология
Ботаника
Бухгалтерский учёт
Войное дело
Генетика
География
Геология
Дизайн
Искусство
История
Кино
Кулинария
Культура
Литература
Математика
Медицина
Металлургия
Мифология
Музыка
Психология
Религия
Спорт
Строительство
Техника
Транспорт
Туризм
Усадьба
Физика
Фотография
Химия
Экология
Электричество
Электроника
Энергетика

Флуоресцентная корреляционная спектроскопия



Флуоресцентная корреляционная спектроскопия может рассматриваться как ветвь динамического рассеяния в негауссовых условиях эксперимента, поскольку флуоресценция является фундаментально некогерентным явлением. ФКС является методом, в котором интенсивность флуоресценции, исходящая от небольшого числа флуоресцентных молекул в очень малом объеме, коррелируется для получения информации о процессах, которые вызывают флуктуации флуоресценции. Одним из важных процессов, который приводит к стохастическому появлению и исчезновению флуоресценции в малом наблюдаемом объеме, является их броуновское движение. Относительная амплитуда флуктуации обратно пропорциональна числу одновременно наблюдаемых молекул. Поэтому присутствие большого числа молекул в макроскопической среде, подавляет эффект таких флуктуаций. Этот простой аргумент показывает, что для ФКС-измерений желательно наличие в микрообъеме очень небольшого числа интенсивно светящихся молекул.

Основные принципы метода ФКС продемонстрированы на рисунке 32.4. Флуктуации сигнала флуоресценции вызываются или диффузией флуоресцирующих молекул через объем, или изменением сигнала во времени из-за химических реакций. По записанному сигналу флуктуации флуоресценции (горизонтальные стрелки) вычисляется автокорреляционная функция (вертикальные стрелки). Из функции автокорреляции могут быть получены среднее время жизни (τср) и число молекул (N) в объеме. По этим данным и размеру флуоресцирующего объема, можно определить коэффициент диффузии D флуоресцирующей молекулы. Значение D может быть использовано для оценки формирования молекулярных комплексов, поскольку коэффициент диффузии частицы в изолированном состоянии (закрашено зеленым) будет больше, чем коэффициент диффузии молекулярного комплекса (закрашено красным и зеленым цветом) (см. рис. 32.4).

Рис. 32.4. Основные принципы ФКС (см. текст) (см. картинку из нейрофизиологии)

 

Если мы определим отклонение мгновенного значения от среднего как

(32.6),

то в результате ряда преобразований получаем:

(32.9)

Величину принято называть «флуктуацией», поскольку она определяет отклонение свойства от среднего.

 




Поиск по сайту:

©2015-2020 studopedya.ru Все права принадлежат авторам размещенных материалов.