Действие фосфолипаз поджелудочного сока

Принцип метода. Об активности фосфолипаз поджелудочного сока судят по появлению свободной фосфорной кислоты, способной образовать желтый осадок при нагнревании с молибдатом аммония.

H₃PO₄+12(NH₄)₂MoO₄+21HNO₃→(NH₄)₃PO₄·12MoO₃+21NH₄NO₃+12H₂O

Фосфорномолибденовокислый аммоний

Ход работы. В 2 пробирки наливают по 5 капель суспензии яичного желтка. В 1 пробирку добавляют 2 капли панкреатина, во 2(контрольную) – 2 капли Н₂О. Обе пробирки ставят в термостат на 30 минут при температуре 38^оС. Потом в обе пробирки добавляют по 5 капель молибденового реактива и нагревают на плпмнени горелки. Охлаждают под краном. Наблюдают изменение окраски. Делают вывод.

Контрольные вопросы

1. Укажите, как называется данное химическое соединение:

а) холестерон б) холистерид в) холин г) капростерин

д) циклопентанпергидрофенантрен

2. Как называется данное химическое соединение?

3. Как называется данное химическое соединение?

4. Назовите данное соединение?

5. Укажите, какие химические вещества входят в состав α-лецитина: серин, холин, коламин, стеариновая кислота,пальмитиновая кислота, линолевая кислота, линоленовая кислота, олеиновая кислота.

6. Укажите, какие химические соединения входят в состав кефалинов: пальмитиновая кислота, стеариновая кислота, олеиновая кислота, линолевая кислота, холин, серин, коламин, этаноламин.

7. Напишите строение α-лицитина, холестерина.

8. Напишите формулу эфира, образованного при взаимодействии холестерина и стеариновой кислот.

9. К какой группе фосфолипидов относятся кефалин и серинфосфатиды?

10. В какие ткани входят в больших количествах определение сфингомиелины?

11. Перечислите названия фосфатидов неглицеридов.

12. Объясните использование количественного определения фосфолипидов в медицинской практике.

13. Напишите формулу фосфолипида, в состав которого входит холин. Назовите его.

14. В состав каких фосфолипидов входит этаноламин (коламин)? Напишите его формулу.

15. Напишите реакции расщепления ацил-стероидов

16. Напишите реакции расщепления лецитина.

17. Напишите реакции расщепления стеарилстерида.

18. Какую роль выполняет α- и β –липопротеиды?

19. Какие желчные кислоты имеются в желчи, какова их химическая природа?

20. Какие виды фосфолипидов Вы знаете?

21. Какие связи гидролизует фосфолипаза А?

22. Какая фосфолипаза гидролизует эфирную связь между фосфорной кислотой и глицерином в фосфоролипиде?

23. как всасываются продукты расщепления стеридов?

24. Укажите, какое химическое соединение является исходным продуктом для синтеза холина.

25. Укажите, сколько молекул субстрата нужно для синтеза холина.

26. Напишите реакцию активации холина до образования: фосфохолина, цитидинфосфохолина.

27. Напишите реакцию взаимодействия диглицерида с цитидинфосфохолином с образованием лецитина.

28. Напишите реакцию образования коламина (этаноламина).

29. Напишите реакцию метилирования коламина с образованием холина.

30. Какие исходные продукты нужны для синтеза холестерина?

31. Напишите химизм реакции синтеза холина.

32. Какое значение в медицинской практике имеет определение общих липидов крови?

Итоговая работа по теме «Обмен липидов»

1.

1. Какая химическая связь характерна для нейтральных жиров?

2. Напишите формулу холина.

3. В норме после приема с пищей большого количества углеводов увеличивается активность ЛП-липазы в жировой ткани. Покажите связь между обменом жиров и углеводов, построив из предложенных процессов, правильную последовательность событий.

1. Ускорение синтеза жиров в печени.

2. Увеличение концентрации глюкозы в крови.

3. Ускорение синтеза ЛОНП.

4. Увеличение утилизации глюкозы клетками печени.

5. Увеличение концентрации инсулина в крови.

6. Увеличение концентрации инсулина в жировой ткани.

7. Увеличение скорости синтеза жиров в жировой ткани.

2.

1. Переваривание липидов. Ферменты.

2. Из представленных ниже метаболитов постройте схему кетоновых тел в организме человека (1 2 …). Укажите названия ферментов над стрелками.

1. Ацетоацил-КоА 4. β-гидрокси-β –метилглутарил-КоА

2. Ацетоацетат 5. Ацетон

3. Ацетил-КоА 6. β-гидроксибутират

3. Приведите формулу пальмитата холестерина. Биологическая роль транспортных форм холестерина. Холестеринемия.

3.

1. Какие последствия может иметь нарушения всасывания жиров?

1. Стеаторея

2. Гиповитаминоз Д

3. Гиповитаминоз К

4. Ухудшение зрения в темноте (куриная слепота)

5. Гиповитаминоз РР

6. Нарушение синтеза насыщенных жирных кислот

7. Уменьшение содержания арахидоновой кислоты в тканях.

2. Сколько молекул АТФ синтезируется в процессе распада глицерина в анаэробных и аэробных условиях?

3. Биосинтез холестерина. У кого он более интенсивен: у вегетарианцев или у остальных?

4.

1. Распад глицерина. Сходство и различие с распадом глюкозы.

2. На каком клеточном уровне происходит окисление жирных кислот.

3. В печени часть неэтифицированного холестерина идет на образование желчных кислот.

А. Покажите, какие желчные кислоты образуются в клетках печени и какие превращения с ними происходят в кишечнике.

Б. Что такое энтерогепатическая циркуляция? Все ли молекулы первичных желчных кислот возвращаются в печень в неизменном виде?

В. Как влияет коньюгация с глицерином и таурином на амфифильные свойства желчных кислот? Ответ проиллюстрируйте на примере холевой и таурохолевой кислот.

Г. Перечислите функции желчных кислот в организме. К каким нарушениям обмена веществ ведет снижение секреции желчных кислот в желчь или прекращение поступления желчи в кишечник?

5.

1. Напишите уравнение реакции активации жирной кислоты.

2. Напишите уравнение реакции расщепления ацил-стеридов.

3. Посчитайте, сколько молекул восстановленного НАД-а образуется при окисления пальмитиновой кислоты.

6.

1. Напишите по одной формуле триглицеринов, характерных для:

А. Твердого животного жира

Б. Растительного жира.

2. При интенсивной физической нагрузке в течении 30 минут в крови экспериментальных животных определяли концентрацию жирных кислот. Для случаев А и Б укажите, где эта величина больше.

А. В крови, питающей жировую ткань (артериальной), или в крови, оттекающей от нее (венозной). Напишите реакции обмена жиров, которая в этих условиях в жировой ткани являются первичной артериовенозной разницы.

Б. В крови, питающей миокард (артериальной), или в крови, отекающей от него (венозной). Объясните ответ.

3. У пациента натощак была исследована сыворотка крови. Сыворотка имела молочный цвет; на ее поверхности, при помещении на холод всплыли белые жирные хлопья. Содержание триглицеридов составило 8 ммоль/л. Укажите возможные причины заболевания, признаки которых описаны.

1. Недостаточная активность ЛП-липазы

2. Недостаточная активность панкреатической липазы

3. Дефект аполипопротеинов в составе хиломикронов

4. Дефект аполипротеинов в составе ЛВП

5. Недостаточное поступление витаминов А, Е, Д, К.

7.

1. Подберите к каждому типу липидов и их производных соответствующую функцию.

1. Триацилглицериды 2. Жирные кислоты

3. Сфингомиелины 4. Простагландины

5. Таурохолевая кислота 6. Витамин Е

7. Витамин К.

А. Источники энергии, структурные компоненты других липидов:

Б. Запасная форма источника энергии

В. Структурный компонент мембран

Г. Регуляторы тонуса гладкой мускулатуры

Д. Антигеморрагический фактор

Е. Эмульгатор Р. Антиоксидант.

2. Выберите доноры водорода, необходимые для синтеза жирных кислот в организме человека:

1. ФАДН 2. НАДН

3. Аскорбиновая кислота 4. НАДФН

5. ОН

3. А. Яд некоторых змей содержит фосфолипазу А₂. Если к цельной крови добавить небольшое количество яда, то быстро наступает гемолиз. Напишите реакцию, которая будет происходить под действием фермента – компонента яда. Объясните причину гемолиза в данном случае.

Б. Будет ли изменятся структура сфингомиелина под действием этого фермента?

8.

1. Напишите реакции окисления стеариновой кислоты до пальмитиновой.

2. Напишите реакции биосинтеза ацетилхолина.

3. Какое количество моль АТФ образуется при полном окислении:

А. 2 моль ацетоацетата

Б. 1 моль β-гидроксибутирата?

9.

1. Напишите химизм образования малонил коА´. Для чего он используется?

2. Какие виды фосфолипаз вы знаете? Напишите уравнения реакций расщепления лецитина.

3. Что входит в понятие «ацетоновые тела», изобразите химизм образования их. Диагностическое значение определения ацетоновых тел.

10.

1. Распад триглицеридов. Роль парных желчных кислот.

2. Транспортные формы липопротеинов и их диагностическое значение.

3. Схема превращения глюкозы в холестерин.

11.

1. Изобразите химизм синтеза животного жира триглицерида.

2. Напишите уравнение реакции взаимодействия диглицерида с цитидинофосфохолином с образованием лецитина.

3. Сколько молекул восстановленного кофермента НАДФ Н+ Н⁺ необходимо для синтеза пальмитиновой кислоты?

12.

1. Изобразите уравнение реакций удлинения углеродной цепи бутирил-АПБ до капроновой кислоты.

2. Химизм биосинтеза холестерина. Регуляция процесса.

3. Для каждого типа липопротеинов подберите соответствующий состав.

1. ЛВП А. 90% триглицеридов и 2% белков

2. хиломикроны Б. 50% эфиров холестерина и холестерина

3. ЛНП В. 50% белков и 20% эфира холестерина и холестерина

4. ЛОНП Г. 10% белков и 50-55% триацилглицеринов

13.

1. Напишите уравнение реакции образования свободной ацетилуксусной кислоты и какова ее дальнейшая судьба.

2. В стационар поступил юноша с симптомами ишемической болезни сердца в результате атеросклероза. В ходе обследования обнаружилось, что у больного липопротеины содержат малоактивный фермент лецитинхолестеролацилрансферазу (ЛХАТ).

А. Напишите уравнение, которое катализирует ЛХАТ.

Б. Какие фракции липопротеинов богаты ЛХАТ?

В. Почему недостаточность ЛХАТ может привести к развитию атеросклероза?

3. Приблизительно одна треть жиров, полученных с пищей, должна быть растительного происхождения. Подтвердите это, дав ответы на следующие вопросы:

А. Назовите известные вам незаменимые факторы питания, которые содержатся в растительных маслах.

Б. Синтез каких регуляторных молекул производных липидов будет нарушен при недостатке этих факторов?

В. Какие функции выполняют в организме эти производные липидов?

14.

1. Какие исходные продукты нужны для синтеза холестерина? Биологическая роль холестерина.

2. Напишите химизм реакций синтеза животного жира.

3. Опишите судьбу глицерина. Может ли он использоваться для синтеза глюкозы?

15.

1. У человека, длительно не употреблявшего жиров, но получавшего достаточное количество углеводов и белков, обнаружены дерматит, плохое заживление ран, ухудшение зрения, снижена половая функция. При назначении терапевтической диеты, содержащей рыбий жир, симптомы исчезли. Выберите возможные причины нарушения обмена:

1. Недостаток пальмитиновой кислоты

2. Недостаток линолевой кислоты

3. Недостаток олеиновой кислоты

4. Недостаточное поступление витаминов А, Д, Е, К

5. Недостаточное поступление витаминов Н, РР

6. Низкая калорийность диеты.

2. А. Рассчитайте, сколько молекул АТФ образуется при окислении одной молекулы стеариновой кислоты до СО₂ и Н₂О.

Б. Если окисляется линолевая кислота, то на сколько молекул АТФ образуется меньше?

3. Из представленных ниже компонентов составьте схему синтеза фосфотидилхолина:

1. этиноламин,

2. фосфоэтаноламин,

3. ЦДФ-этаноламин,

4. фосфатидилэтаноламин,

5. фосфатидилхолин.

Обмен нуклеотидов

Цель изучения: I. Знать теоретически а) основные данные по процессам переваривания (разнообразие нуклеаз, понятие о рестриктазах), всасывания и внутриклеточного обмена нуклеопротеинов, нуклеиновых кислот и азотистых оснований нуклеотидов, б) образование конечных продуктов пуринового и пиримидинового обмена и нарушения при подагре, в) биосинтез пиримидиновых нуклеотидов и его нарушения (оротацидурия), г) понятие о механизме биосинтеза пуриновых нуклеотидов, д) примеры ингибиторов, противоопухолевых и противовирусных препаратов.

II. Уметь определить содержание мочевой кислоты в моче, как конечного продукта обмена пуриновых оснований.

III. Ответить на прилагаемые к занятию 15 вопросов и упражнений по данной теме.

IV. Содержание темы:

1. Роль нуклеотидов: а) субстраты синтеза ДНК и РНК; б) цикл АТФ-АДФ- универсальный механизм трансформации энергии; в) УТФ активирует монозы при синтезе полисахаридов, ЦТФ активирует синтез фосфатидов, ГТФ участвует в биосинтезе полипептидов на рибосоме; г) УДФ – глюкуронид, ФАФС участвуют в детоксикации ксенобиотиков; д) АМФ – компонент НАД-а, ФАД-а, ФМН, кофермента А; е) ц-АМФ и ц-ГМФ – вторичные посредники гормонального сигнала.

2. НК, поступающие с пищей под действием нуклеаз панкреаса гидролизуются постепенно с образованием фосфатов пентоз и азотистых оснований, однако они не являются незаменимыми пищевыми факторами, т.к. могут синтезироваться в различных клетках организма из простых предшественников de novo.

3. В клетках тканей азотистые основания, содержащие – NH₂ (цитозин, аденин, гуанин) во-первых подвергается гидролитическому дезаминированию, превращаясь соответственно в урацил, гипоксантин и ксантин.

4. Пиримидиновые ядра восстанавливаются по двойной связи кольца лактамной формы, после чего происходит раскрытие кольца с образованием СО₂, NH₃, β-аланина из урацила и β-аминоизомасляной кислоты из тимина.

5. Конечные продукты (СО₂, NH₃) выводятся из организма либо утилизируются в других метаболических процессах (аминирование, карбоксилирование, биосинтез карнитина, ансерина, пантотеновой кислоты).

6. Пуриновые основания после дезаминирования окисляются ксантиноксидазой до мочевой кислоты в результате появления атомов кислорода у С₂, и С₈. Т.о. мочевая кислота – 2,6,8 –тригидроксипурин – конечный продукт распада пуриновых оснований.

7. Мочевая кислота – труднорастворима, слабо диссоциирует по N₈, образуя ураты, в крови циркулирует в комплексе с альбумином, (N- 3-7мг/дл) ежесуточно выводится через почки от 0,4 до 0,7г.

8. Гиперурикемия ведет к подагре – отложению кристаллов уратов в суставных хрящах, синовиальной оболочке, подкожной клетчатке с образованием подагрических узлов или тофусов, в результате возникают повторяющиеся приступы острого воспаления суставов. Подагра может развиться и при болезни Гирке (недостаточности глюкозо-6-фосфатазы) как ответ на усиленный синтез пуринов при интенсивном пентозном пути распада глюкозы. Синдром Леша-Нихана – тяжелая форма гиперурикемии в результате дефекта фермента, обеспечивающего повторное связывание нераспавшихся пуринов в нуклеотиды. Болезнь обнаруживается у мальчиков появлением тофусов, неврологических расстройств, склонностью к нанесению себе увечий (укусы губ, языка, пальцев).

9. Основными препаратами лечения гиперурикемии являются повышающие растворимость мочевой кислоты (уродан) и основной ингибитор ксантиноксидазы – аллопуринол, конкурирующий со структурой гипоксантина.

10. Пиримидиновые нуклеотиды синтезируются в цитозоле из простых предшественников: глн (источник NH₃), СО₂ и асп до оротовой кислоты, после чего она пересаживается на хорошо активированную рибозу в результате чего после декарбоксилирования образуется УМФ. При дефекте гена, кодирующего эти 2 последние реакции, оротовая кислота накапливается и в больших количествах (> 1 г/сутки при N синтеза ~ 600 мг) выводится с мочой (оротацидурия), что влечет за собой пиримидиновый голод. При этом применяется заместительная терапия уридином (до 1г/сутки).

11. Биосинтез дезоксирибонуклеотидов включает в себя восстановление рибозы тиоредоксином (доноры водорода – 2 SH – группы) и метилированием дУМФ N⁵-CH₂ –N¹⁰ – тетрагидрофолатом.

12. N⁵, N¹⁰ – H₄ фолат, а также N¹⁰- формил H₄ – фолат являются источниками С₂ и С₈ при синтезе пуринов, где участвуют глн для N₃ и N_9, гли (для С₄, С₅ и N₇) СО₂ (для С₆) и асп (для N₁). Реакции идут последовательно сразу на хорошо активированной рибозе, формируя сначала имидазольный, а потом и пиримидиновый цикл.

13. Исходным нуклеотидом для АМФ и ГМФ является ИМФ, который аминируется соответственно по С₆ до АМФ и через ксантозин-5^'монофосфат до ГМФ.

14. Аналоги тимидина (азидотимидин, 5-I-дезоксиуридин) 6-меркаптопурин ингибируют биосинтез нуклеотидов, являясь антивирусными препаратами. Аналоги фолиевой кислоты – метотрексат, аминоптерин, а также 5-фторурацил-противоопухолевые препараты, останавливающие репликацию.

Контрольные вопросы по теме «Обмен нуклеотидов»

1. В каком виде поступают в организм НК с продуктами питания?

2. Что происходит с нуклеопротеидами в желудке в процессе переваривания?

3. Объясните механизм, укажите роль ферментов и соляной кислоты.

4. какой химический процесс лежит в основе переваривания в желудочно-кишечном тракте?

5. Напишите схему превращения пиримидиновых оснований в клетках (по пути расщепления до конечных продуктов).

6. Напишите формулы конечных продуктов катаболизма пуриновых и пиримидиновых оснований.

7. Напишите схему образования мочевой кислоты.

8. Нарушение какого обмена приводит к развитию подагры?

9. Какие аминокислоты участвуют в синтезе:

А) пуриновых мононуклеотидлов;

Б) пиримидиновых мононуклеотидов?

10. Напишите схему синтеза пиримидиновых оснований. Укажите источники атомов углерода и азота в цикле пиримидина.

11. Как происходит синтез пиримидиновых мононуклеотидов из оротидинмонофосфата?

12. Напишите реакции синтеза оротидинмонофосфата.

13. Объясните схему синтеза пуриновых оснований. Укажите источники атомов углерода и азота в цикле пурина.

14. Напишите формулу инозиновой кислоты, укажите происхождение атомов пуринового ядра.

15. Как происходит синтез пуриновых мононуклеотидов из инозиновой кислоты?

16. Автономная саморегуляция синтеза мононуклеотидов.

Лабораторная работа

Поиск по сайту: