Принцип методу: Метод грунтується на визначення мінімальної кількості ферменту, яка здатна розщепити певну кількість субстрату. Умлвно за одиницю активності амілази сечі приймають кількість мілілітрів 0,1% розчину крохмалю, яку може розщепити 1 мл нерозведеної сечі при температурі 45°С за 15 хвилин. В нормі дорівнює 16-64 одиниць.
Хід роботи: У 8 пробірок наливають по1 мл 0,85 % хлористого натрію. У першу пробірку додають 1 мл сечі, перемішують і переносять 1 мл суміші у другу пробірку. Так само перемішують вміст другої пробірки і переносять 1 мл суміші у третю пробірку і так далі. Отримують ряд розведень, де концентрація ферменту в кожній наступній пробірці в 2 рази менша, ніж у попередній. З останньої пробірки 1 мл суміші виливають для зрівняння об’ємів.
Далі у кожну пробірку наливають по 2 мл розчину крохмалю, добре перемішують і ставлять на 15 хв. у водяну баню при температурі 45°С. Після цього пробірки охолоджують проточною водою і в кожній проробляють реакцію з йодом. Відмічають останню пробірку з жовтим забарвленням, де гідроліз крохмалю пройшов повністю і розраховують активність амілази сечі.
Клініко-діагностичне значення. Визначення активності a-амілази сечі широко використовєтся в клінічній практиці з метою діагностики захворювань підшлункової залози. При гострих панкреатитах амілазна активність сечі і сироватки крові зростає в 10-30 разів, особливо в першу добу, потім поступово повертається до норми. При нирковій недостатності амілаза в сечі відсутня.
Лiтература.
1. Конспект лекцiй.
2. Биологическая химия /Воронина Л.Н. и др.- Х.:Основа, 1999. – 640 с.
Тема: Обмін речовин в організмі. Фотосинтез. Перетворення хімічної енергії в організмі. Окисне фосфорилювання, фармпрепарати, що впливають на енергетичний обмін в організмі. Біоенергетика і порушення обміну речовин при захворюваннях.
Актуальнiсть теми:В процесі фотосинтезу утворюються білок, жири, вуглеводи, які складають фізіологічний харчовий раціон людини. Останні піддаються перетворенням в організмі людини для підтримки стабільності гомеостазу та енергії для забезпечення функції органів та систем.Енергетичні потреби організму забезпечуються за рахунок енергії, яка вивільняється у процесі тканинного (клітинного) дихання. Порушення цього процесу внаслідок цілого ряду причин зумовлює гіпоенергетичний стан, що є одним із патогенетичних механізмів багатьох хвороб. Фармакологічна дія багатьох лікувальних препаратів проявляється у змінах біоенергетичних процесів, спряженні чи роз΄єднанні тканинного дихання і синтезу АТФ.
Навчальнi цiлi:
Знати: структуру компонентів дихального ланцюга, механізм переносу електронів і протонів.