Все объекты рассматриваются в проходящем свете сухим и иммерсионным объективом
Разрешающая способность - 0,4-0,2 мкм. Увеличение при данной длине тубуса равно произведению увеличений объектива и окуляра. Минимальное - 6ЗО (для иммерсионного объектива) и максимальное -1350
Используется для изучения морфологии, структуры, подвижности и тинкториальных свойств микроорганизмов
Люминесцентный микроскоп
Использование ультрафиолетовых лучей и люминесцирующих красителей, способных светиться (флюоресцировать) под УФ - лучами. Позволяет наблюдать микроорганизмы в излучаемом ими свете и цвете
Разрешающая способность - 0.1 мкм. Повышение её связано с использованием коротковолновых ультрафиолетовых лучей. Максимальное увеличение - в 3000 раз. Преимущество- цветное изображение, высокая контрастность, возможность исследовать живые объекты.
Используется не только для изучения морфологии, и тинкториальных свойств, но и для исследования процессов жизнедеятельности микробной клетки.
Электронный микроскоп
Принцип действия и устройства подобен таковым у обычного светового микроскопа. Различия - вместо источника света – источник электроволн (вольфрамовая проволока, нагреваемая
электротоком,
вместо оптических линз - электромагнитные).
Разрешающая - способность 0.001 мкм. Первое промежуточное увеличение в 130 раз, от проекционной линзы - в 20 - 200 раз, в целом - 2500-25 000, максимум –
в 100 000 раз.
Широко используется для изучения вирусов, мельчайших микроорганизмов. В бактериологии используется для изучения деталей тонкого строения.
Исследования проводят в проходящем свете в светлом или тёмном поле с применением метода фазового контраста. МБИ - 12,13 снабжены собственными столиками-термостатами, кинокамерами. Линзы окуляра и
Объектива дают обратное увеличенное изображение.
Позволяет проводить широкий круг микроскопических исследований, визуальное наблюдение, фотографирование, применение светлого и тёмного полей в прямом и отражённом свете, прямое и косое освещение, микроскопирование в поляризованном свете, методом фазовых контрастов, в свете люминесценции.
Стереомикроскоп
Даёт подсвет в прямом и косопроходящем свете
Наиболее пригоден для крупных объектов (грибов)
Изучение колоний, микологических культур.
Приложение 3
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА К МИКРОСКОПУ
Бинокулярная насадка АУ - 12
Приближает микроскопию к условиям естественного зрения. Повышение трудоспособности работающего с микроскопом
Разрешающая способность несколько повышена
Применим к любому микроскопу
Микрометр
- объект
- окуляр
Объект-микрометр и окуляр-микрометр позволяют
определить размеры бактерий с помощью расчётных сеток
Разрешающая способность несколько повышается, даёт возможность изучать микроорганизмы в нативном состоянии
Для изучения
размеров
Темнопольный конденсор к световому микроскопу
Затемнение центральной части
конденсора и, как следствие, боковое освещение объекта позволяет на тёмном фоне препарата видеть микроорганизмы в отражённом от них свете
Разрешающая способность повышается
То же, что и при темнопольной
микроскопии
Фазово-контрастное
устройство (объектив)
При обычной микроскопии в проходящем свете повышает контрастность и отражение за счет
превращения фазовых смещений световой волны в амплитудные, улавливаемые глазом
В отличие от
темнопольного
устройства - даёт возможность наблюдать контрастные живые неокрашенные объекты на световом фоне
Используется для
наблюдения за
живыми биообъектами
Столик-термостат
Сохраняет подвижность объекта
Сохраняет
жизнеспособность
При анализе
простейших.
Приложение 4
ОБЕЗЖИРИВАНИЕ СТЁКОЛ производят одним из приведённых способов:
Назначение - хорошее прикрепление объекта.
а) Новые стёкла кипятят в 1 % растворе соды, затем промывают водой, слабым раствором соляной кислоты, вновь тщательно промывают водой.
б) Стёкла, бывшие в употреблении, сначала помещают в концентрированную серную кислоту или в смесь из 100 частей серной кислоты и 50 частей двухромовокислого калия и
1000 частей воды на 2 часа, после чего кипятят в щёлочи, тщательно промывают водой.
в) Погрузить стёкла в смесь 6 % хромовокислого калия и серной кислоты на 24 часа, после чего тщательно промывают водой. Хранят стёкла в 96 % растворе спирта.
г) Перед работой стёкла протереть мылом, прогреть на спиртовке, насухо вытереть марлей.
Приложение 5
ПРИГОТОВЛЕНИЕ И ОКРАСКА МИКРОПРЕПАРАТОВ:
1. Подготовить для микроскопии 4 предметных стекла:
- обезжирить предметные стёкла, тщательно протерев их мылом и марлей;
- стёкла с помощью пинцета внести в пламя спиртовки, прогреть, охладить;
- тщательно протереть сухим ватным тампоном.
2. Приготовить 3 мазка из микробов, выросших на жидкой среде (обратить внимание на правильное положение рук: правой - держащей пробирку с ростом микробов в МПБ и левой - бактериальную петлю и ватную пробку);
- обжечь петлю в пламени спиртовки;
- охладить;
- открыть пробку пробирки левой рукой (мизинцем), обжечь её края над пламенем спиртовки;
- внести в МПБ петлю, взять 1 каплю культуры;
- обжечь края пробирки, пробку, закрыть пробирку, поставив её в штатив (не выпуская из правой руки петлю с материалом);
- обезжиренное, обожжённое в пламени спиртовки и охлаждённое предметное стекло взять большим и указательным пальцами в левую руку;
- петлёй материал нанести на стекло, равномерно растирая круговыми движениями по поверхности в виде круга;
- препарат высушить на воздухе и затем фиксировать методом фламбирования или прогрева, трижды внося в пламя спиртовки, охладить;
- пипеткой налить на мазок 3-4 капли красителя (метиленовый синий) на 3-4 мин.;
- промыть препарат водой, высушить на воздухе. Мазок готов для микроскопии:
3. Приготовить мазок из микробной культуры, выросшей на плотной среде - МПА:
- на обезжиренное стекло нанести каплю воды или физиологического раствора;
- с поверхности среды (обратить внимание на правильность положения пробирки с ростом скошенной поверхностью кверху), петлёй осторожно взять материал;
- обжечь края пробирки, пробку закрыть, поставить в штатив, не выпуская из рук петлю с культурой;
- внести материал петлёй в каплю воды на предметном стекле, равномерно растереть, на стекле с обратной стороны обозначить овалом или квадратом место нанесения материала;
- высушить на воздухе;
- фиксировать фламбированием, внося в пламя спиртовки трижды, охладить.
